[发明专利]一种6-苄基腺嘌呤半抗原、人工抗原及其在免疫检测中的应用

说明书

本发明公开了一种6‑苄基腺嘌呤半抗原、人工抗原及其在免疫检测中的应用。本发明通过化合物a和化合物b多步反应得到6‑苄基腺嘌呤半抗原，所得半抗原引入的手臂不仅具有活性基团，还完整保留了待测目标物的所有胺基；且使用半抗原制得的人工抗原及单克隆抗体IC50值为1.6μg/L，可快速、便捷地实现6‑BA的检测，本发明中制备的荧光定量免疫层析试纸条对6‑BA检测灵敏度为2μg/L。

技术领域

本发明属于免疫检测领域，特别涉及一种6-苄基腺嘌呤半抗原、人工抗原及其在免疫检测中的应用。

背景技术

6-苄基腺嘌呤(6-benzylarninopuring，6-BA)是第一个人工合成的细胞分裂素，为白色或类白色晶体，难溶于水，微溶于乙醇，在酸、碱中稳定，具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质的分解，保绿防老；将氨基酸、生长素、无机盐等向处理部位调运等多种效能，广泛用在农业、果树和园艺作物从发芽到收获的各个阶段。由于6-BA药效良好、价格低廉，被当成一种生长调节剂广泛应用于无根培植豆芽的种植中。

人体摄入过多的6-BA会刺激皮肤黏膜，造成食道、胃黏膜损伤，出现恶心、呕吐等。原国家食品药品监督管理总局、农业部、国家卫生和计划生育委员会均禁止在豆芽生产过程中使用6-苄基腺嘌呤。因此加强对6-BA呤残留量监测对于保证食品质量安全十分重要。

目前，用于检测6-BA的方法主要为传统的检测方法，如分光光度法、高效液相色谱法及其联用技术等，以上方法虽然可以精确定量，但由于设备仪器昂贵，检测时间长，且需专业人员操作，无法实现真正意义上的现场快速检测；另一种检测方法为免疫学检测技术，此方法具有高特异性和高选择性的特点，非常适用于复杂基质痕量组分的分离或检测，随着学科间的相互渗透，其检测方法层出不穷，应用范围亦日益扩大，与传统检测方法相比，免疫学检测技术具有经济、快速、技术要点低、操作简便等特点。但免疫分析检测技术的关键是抗原和抗体的性能决定的，而抗原和抗体的关键又是相应的半抗原，因此，要得到性能优异的抗原和抗体，半抗原的结构设计就显得尤为重要。

因此需设计出具有更高识别度的完全抗原成为亟需解决的问题。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种6-苄基腺嘌呤半抗原；

本发明的另一目的在于提供上述的半抗原的制备方法；

本发明的另一目的在于提供一种人工抗原；

本发明的另一目的在于提供一种上述人工抗原的制备方法；

本发明的另一目的在于提供一种6-苄基腺嘌呤单克隆抗体；

本发明的另一目的在于提供上述6-苄基腺嘌呤单克隆抗体在ELISA检测方法中的应用；

本发明的另一目的在于提供上述6-苄基腺嘌呤单克隆抗体在免疫层析中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种6-苄基腺嘌呤荧光定量免疫层析试纸条。

本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供：

一种6-苄基腺嘌呤半抗原，其具有式I所示的结构式：

本发明的第二个方面，提供：

上述的半抗原的制备方法，包括如下步骤：

化合物a和化合物b反应得到化合物c；

化合物c水解得到半抗原

其中，化合物a的结构式为

化合物b的结构式为

化合物c的结构式为

进一步地，上述制备方法，还包括以下步骤：