[发明专利]一种提取细胞中蛋白的裂解液及其制备方法

说明书

本发明提供了一种提取细胞中蛋白的裂解液，包括如下原料：NP‑40、NaCl、Tris‑HCl、SDS、泊洛沙姆、聚乙二醇。本发明还提供了一种提取细胞中蛋白的裂解液的制备方法。本发明所述的提取细胞中蛋白的裂解液，通过各成分的配合，能更好的兼顾蛋白溶解率与蛋白的稳定，以便提取到的蛋白质在后续的免疫沉淀分析中，可有效地形成抗原抗体免疫复合物。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体而言，本发明涉及一种提取细胞中蛋白的裂解液及其制备方法。

背景技术

RIPA裂解液是为开展免疫沉淀法分析而对蛋白质进行抽提的试剂。现有的RIPA裂解液中，选用不同的去垢剂对蛋白质进行提取。其中，去垢剂过于温和时，无法达到较好的蛋白溶解率，蛋白质提取效率较低。而以SDS作为强离子型去垢剂与脱氧胆酸盐配合使用，则可以达到较好的蛋白质溶解率，因此，含有SDS的RIPA裂解液得到广泛的应用。但是，SDS的使用会对后续的免疫沉淀分析产生较大影响，使抗原抗体免疫复合物的形成受到抑制。

鉴于此，目前亟待提出一种提取细胞中蛋白的裂解液，能更好的兼顾蛋白溶解率与蛋白的稳定，以便提取到的蛋白质在后续的免疫沉淀分析中，可有效地形成抗原抗体免疫复合物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取细胞中蛋白的裂解液，以解决蛋白溶解率与蛋白的稳定无法兼顾的问题。

为了解决上述问题，本发明提供一种提取细胞中蛋白的裂解液，包括如下原料：NP-40、NaCl、Tris-HCl、SDS、泊洛沙姆、聚乙二醇。

优选地，由各原料组分与纯化水混合而成；各原料组分的终浓度如下：

NP-40为0.7-1.5％；

NaCl为130-210mmol/L；

Tris-HCl为40-60mmol/L；

SDS为0.1-1.0％；

泊洛沙姆为1-5％；

聚乙二醇为3-5％。

需要说明的是，上述百分号均代表质量百分比。

进一步优选地，各原料组分的终浓度如下：

NP-40为1％；

NaCl为150mmol/L；

Tris-HCl为50mmol/L；

SDS为0.5％；

泊洛沙姆为2％；

聚乙二醇为4％。

优选地，所述泊洛沙姆为泊洛沙姆188。所述Tris-HCl的pH值为8.0。

本发明还提供一种提取细胞中蛋白的裂解液的制备方法，包括如下步骤：按用量取NP-40、NaCl、Tris-HCl、SDS、泊洛沙姆、聚乙二醇，将其与纯化水混合均匀而成。

本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：

本发明所述的提取细胞中蛋白的裂解液，包括如下原料：NP-40、NaCl、Tris-HCl、SDS、泊洛沙姆、聚乙二醇。通过各成分的配合，能更好的兼顾蛋白溶解率与蛋白的稳定，以便提取到的蛋白质在后续的免疫沉淀分析中，可有效地形成抗原抗体免疫复合物。

其中，各成分作用如下：

NP-40为Nonidet P 40的缩写，中文名称为乙基苯基聚乙二醇，是一种温和的非离子型去垢剂，与蛋白结合力强，用于防止物质分子疏水间相互作用，确保蛋白的充分溶解和结构稳定，尤其适用于蛋白的非变性条件下的溶解。