[发明专利]一种同步检测养猪废水中多类抗生素残留量的方法

说明书

本发明公开了一种快速高效同步检测养猪废水中多类抗生素残留量的方法，属于痕量环境污染物的检测技术领域。本发明解决了现有检测方法中抗生素检测种类单一、检测水样量大、检出限较高、抗干扰能力差等问题。本发明基于固相萃取‑超高效液相色谱串联质谱技术，通过色谱、质谱、固相萃取及前处理条件的选取，提供了一种同时检测养猪废水中多类抗生素的分析方法。该方法只需要40mL水样，极大地减少了前处理时间；在低、中、高三个水平的加标浓度下，10种抗生素的回收率均在74.1％～118.2％之间，且相对标准偏差在0.14％～11.74％的范围内。此外，本方法检出限低、抗干扰能力强，检测下限达到2.5～10ng/L。

技术领域

本发明涉及一种同步检测养猪废水中多类抗生素残留量的方法，具体涉及一种利用固相萃取-超高效液相色谱串联质谱技术同步检测养猪废水中多类抗生素残留量的方法，属于痕量环境污染物检测技术。

背景技术

本着预防、治疗及促进动物生长的目的，每年有大量的抗生素被用于畜禽养殖业。其中，四环素类、磺胺类及氟喹诺酮类抗生素是养猪业中使用最为广泛的抗生素类别。然而，绝大多数兽药抗生素被摄入动物体内后仅有少量被机体吸收，大部分药物残留以原型随粪便和尿液排出体外，例如：四环素类约有69％～86％、磺胺类约80％～90％、氟喹诺酮类约30％～83.7％被排出体外。这使得养猪废水成为环境水体中抗生素的重要来源之一。虽然抗生素的半衰期不长，但由于其频繁使用并持续输入环境，导致环境中抗生素的“假持久性”，对环境中的微生物及动植物产生直接或间接的毒害作用，并且诱导抗生素抗性细菌及抗性基因的出现，最终威胁人类健康。因此，充分了解养猪废水中的抗生素残留、建立养猪废水中抗生素的检测分析方法十分必要的。

目前国内外已报道的养殖废水或污水中抗生素残留的检测方法中，部分方法仅适用于单一类别抗生素的检测，如中国专利公开号CN108760956A公开的方法仅适用于养殖废水中氟喹诺酮类抗生素的检测；中国专利公开号CN111157665A公开的方法仅适用于水体中磺胺类抗生素的检测。而对于可实现废水中多种抗生素同时测定的检测方法，部分方法存在着方法检出限偏高的问题，如中国专利公开号CN105929047A公开的可同时测定畜禽养殖废水中磺胺类、四环素类、大环内酯类抗生素的方法，采用高效液相色谱仪(HPLC)作为抗生素的检测装置，受HPLC自身灵敏度的限制，方法检出限偏高；部分方法所需水样量大，如中国专利公开号CN106093220A公开的一种污水和污泥中12种典型抗生素的同步检测方法，需要的检测水样量在100～500mL之间，使得水样所需的预处理时间长、工作量大，此外，高水样量对应着高富集倍数，在富集过程中抗生素不仅易折损，也会导致更多的非目标污染物截留在固相萃取小柱中，极大地影响抗生素检测的准确性。

针对现有的检测方法存在局限性，对抗生素检测种类单一、检测水样量大、检出限较高、抗干扰能力差等问题，提供一种多类抗生素残留量的方法是十分必要的。

发明内容

本发明为了解决现有检测方法中抗生素检测种类单一、检测水样量大、检出限较高、抗干扰能力差等问题，提供一种同步检测养猪废水中多类抗生素残留量的方法。

本发明的技术方案：

一种同步检测养猪废水中多类抗生素残留量的方法，该方法包括以下步骤：

步骤一，样品前处理：采集养猪废水水样，离心后取上清液通过微孔滤膜过滤，随后准确吸取40mL滤液，并使用超纯水稀释至200mL，加入0.1g Na₂EDTA，使用6mol/L的盐酸溶液将体系pH调至2.0；

步骤二，固相萃取：使用规格为6cc/200mg的Oasis HLB小柱对步骤一处理后水样进行固相萃取，以实现其富集净化；

步骤三，使用超高液相色谱仪串联三重四级杆质谱仪进行样品检测；