[发明专利]检测血浆中阿维巴坦和头孢他啶浓度的试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种检测血浆中阿维巴坦和头孢他啶浓度的试剂盒及其应用，属于药物分析技术领域。采用本发明的试剂盒检测血浆中阿维巴坦和头孢他啶浓度时，灵敏度高、特异性强、准确且前处理过程简单，5.0分钟之内完成血浆中阿维巴坦和头孢他啶的分离和检测，准确度与精密度基本满足要求，可用于临床上血浆中阿维巴坦和头孢他啶的定量分析，为临床上阿维巴坦和头孢他啶药物浓度监测提供简单快速的检测方法。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种检测血浆中阿维巴坦和头孢他啶浓度的试剂盒及其应用。

背景技术

阿维巴坦(Avibactam，AVT)是非-β-内酰胺β-内酰胺酶抑制剂，研究表明其在临床的相关剂量本身不具有抗菌活性。然而，阿维巴坦可保护β-内酰胺抗生素免受β内酰胺酶的降解，并由此保持β-内酰胺抗生素的抗菌活性。因此，其可与β-内酰胺抗生素联用，用于治疗细菌感染。头孢他啶(Ceftazidime，CTD)属于第三代头孢类抗生素，头孢他啶具有抗菌谱广、耐酶等特点，它对铜绿假单胞菌的抗菌活性强，被广泛用于治疗各种中、重度感染，是治疗感染格兰阴性菌危害患者的首选药物。随着抗菌药物引起的耐药和毒副作用等药物性疾病的不断增加，在使用药物时需要对病人的需要浓度进行监测，从而保证疗效、降低毒副作用、实现个性化给药和治疗。

目前针对阿维巴坦和头孢他啶药物体内浓度检测的方法主要是高效液相色谱法和超高效液相-串联质谱法。文献(梁健成,HPLC法测定微泵给药后头孢他啶血药浓度[J].中国药师,2008,11)公开的检测方法样本量需要大，线性范围较窄，且只针对一种药物进行检测，不适用于临床开展；文献(Henrik Sillén,Determination of avibactam andceftazidimein human plasma samples by LC-MS[J].Bioanalysis.2015；7(12):1423-34)公开的检测方法线性范围较窄，前处理为固相萃取法，前处理方法困难，且成本较高，不利于应用到临床。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明的目的是提供一种检测血浆中阿维巴坦和头孢他啶浓度的试剂盒。

本发明的另一目的是提供上述试剂盒在利用超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中阿维巴坦和头孢他啶药物浓度的应用。

为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种检测血浆中阿维巴坦和头孢他啶浓度的试剂盒，包括：流动相、校准品溶液、混合内标溶液、蛋白质沉淀剂、复溶液、质控品；

所述流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为0.01％～0.2％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；

所述校准品溶液包括系列浓度已知的由空白血浆基质配制的阿维巴坦和头孢他啶的混合溶液；

所述混合内标溶液为浓度已知的由甲醇配制的阿维巴坦-13C5(AVT-13C5)和头孢他啶-d5(CTD-d5)的混合溶液；

所述复溶液为1％～50％甲醇水溶液；

所述蛋白质沉淀剂为甲醇和乙腈的混合溶液；

所述质控品包括浓度已知的由空白血浆基质配制的阿维巴坦和头孢他啶的混合溶液。

进一步地，所述流动相A为0.1％甲酸水溶液。

进一步地，所述蛋白质沉淀剂中甲醇与乙腈的体积比1～2:1。

进一步地，所述蛋白质沉淀剂中甲醇与乙腈的体积比1:1。

进一步地，所述标准品溶液包括8种浓度的由空白血浆基质配制的阿维巴坦和头孢他啶的混合溶液。