[发明专利]抗烟草花叶病毒的化合物、制备方法及其用途及含有该化合物的烟草花叶病毒抑制剂有效
申请号: | 202010513776.9 | 申请日: | 2020-06-08 |
公开(公告)号: | CN111574492B | 公开(公告)日: | 2022-05-20 |
发明(设计)人: | 周敏;胡秋芬;杨光宇;汪伟光;董淼;杨文武;高茜;刘欣;李雪梅;米其利;李晶;王晋;黄海涛;许永 | 申请(专利权)人: | 云南民族大学 |
主分类号: | C07D311/76 | 分类号: | C07D311/76;A01N43/16;A01N43/22;A01P1/00;A01P21/00 |
代理公司: | 昆明知道专利事务所(特殊普通合伙企业) 53116 | 代理人: | 姜开侠;姜开远 |
地址: | 650500 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 烟草 花叶 病毒 化合物 制备 方法 及其 用途 含有 抑制剂 | ||
1.一种抗烟草花叶病毒的化合物,其特征在于,结构式如下:
。
2.权利要求1所述的抗烟草花叶病毒的化合物的制备方法,包括样品提取、硅胶柱层析、高效液相色谱分离及凝胶柱层析,其特征在于,具体包括以下步骤:
A、样品提取:烤烟烟叶采烤后,将烟茎的茎皮剥下晒干、粉碎至30~50目作为原料,用提取溶剂回流提取2~5次,每次提取溶剂为样品质量的2~6倍,提取时间为 30~60分钟,合并提取液并过滤,滤液减压浓缩至刚有沉淀物析出,静置20~60分钟,滤除沉淀物得到样品提取液;再将样品提取液减压浓缩成浸膏;
B、硅胶柱层析:将所述浸膏上硅胶柱层析,以氯仿和丙酮体积比依次为10:0、9:1、8:2、7:3、6:4和5:5的氯仿-丙酮洗脱液进行梯度洗脱,经TLC监测,收集各梯度的梯度洗脱液并浓缩;
C、高效液相色谱分离:将步骤B采用体积比为9:1的氯仿-丙酮洗脱液洗脱所得部分再采用高效液相色谱分离纯化得粗品;
D、凝胶柱层析:将所述粗品用甲醇溶解,再以甲醇为流动相,用凝胶柱层析分离纯化即得目标物;
其中,所述高效液相色谱分离纯化条件如下:以体积浓度为70~80%的甲醇水溶液为流动相,流速15~25 mL/min,以21.2 × 250 mm,5 μm的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相,紫外检测器检测波长为362nm,每次进样0.5 ~ 1.0 mL,收集30 ~ 45 min的色谱峰,多次累加后蒸干;
所述步骤 A的提取溶剂为70~100%的丙酮水溶液、90~100%的乙醇水溶液或90~100%的甲醇水溶液;
所述步骤B中硅胶柱装柱硅胶为160~200目,所述装柱硅胶的重量为6~10倍浸膏重量;
所述步骤 B中浸膏在经硅胶柱层析前,用1.5~3倍浸膏重量份的丙酮或甲醇溶解浓缩物,再用0.8~1.2倍浸膏重量份的80~100目硅胶拌样后上样。
3.权利要求1所述抗烟草花叶病毒的化合物在防治烟草花叶病中的用途。
4.一种烟草花叶病毒抑制剂,其特征在于,包括以下比例的原料:2.5~10%权利要求1所述化合物、2.5~10 ppm芸苔素内酯、2-5%氨基寡糖素、20~30%麦芽糖糊精,其余量为水。
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