[发明专利]一种提高植物PAL酶活性与苯丙烷合成通路活性的方法有效
| 申请号： | 202010515709.0 | 申请日： | 2020-06-09 |
| 公开（公告）号： | CN111893132B | 公开（公告）日： | 2022-04-08 |
| 发明（设计）人： | 赵婷婷;许向阳;吴泰茹;王子玉;裴童;杨欢欢;姜景彬;张贺;李景富;陈秀玲;王傲雪 | 申请（专利权）人： | 东北农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 王志新 |
| 地址： | 150030 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 植物 pal 活性 丙烷 合成 通路 方法 | ||
1.一种提高植物PAL酶活性与苯丙烷合成通路活性的方法，其特征在于，将SEQ IDNo.1所示的基因序列构建到植物表达载体中，然后导入农杆菌中，通过农杆菌侵染法转化植物，经培养后获得转基因材料；所述植物为番茄。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤如下：
1）提取番茄RNA，经反转录后获得cDNA；
2）以序列号为Solyc05g056120.2.1的CDS区设计引物，以步骤1）得到的cDNA为模板进行PCR扩增得到Solyc05g056120.2.1序列的CDS区；
3）将步骤2）得到的CDS区序列插入到PCAM2300载体中，得到植物重组表达载体；
4）然后转化农杆菌，通过农杆菌侵染法转化番茄得到转基因番茄。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1）所述的番茄为Micro-TOM。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤2）所述引物为：
F：GGGAAATACCCCAGTTTACACCATCTACTC；
R：CACAGCCAACTCCTCCTCGTGTTCACTCAGCTG。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤3）中所述CDS区序列插入到PCAM2300载体的方法为：将PCAM2300载体和步骤2）中PCR扩增产物分别经SmaI和SalI双酶切，得到的载体片段与酶切后PCR扩增产物经T4DNA 连接酶连接。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述农杆菌为GV3101。
7.SEQ ID No.1所示的基因在提高植物PAL酶活性和/或苯丙烷合成通路活性中的应用；所述植物为番茄。
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