[发明专利]一种树突状细胞制剂及其应用

说明书

本发明公开了一种治疗性树突状细胞癌症疫苗及其应用，属于生物技术领域。本发明构建了一种能够同时表达肿瘤相关抗原、粒‑巨核细胞集落刺激因子(GM‑CSF)、CD40L和4‑1BBL的穿梭质粒pGBC‑IRES‑WSL及重组腺病毒，并将该重组腺病毒感染人外周血来源的单核细胞获得治疗性树突状细胞癌症疫苗。该癌症疫苗可以通过诱导机体产生抗原特异性T淋巴细胞而发挥抗肿瘤作用，从而用于治疗各种血液系统肿瘤和实体肿瘤。

技术领域

本发明属于生物技术领域中的治疗性癌症疫苗的制备，具体涉及一种治疗性树突状细胞癌症疫苗及其应用。

背景技术

癌症是全球持续关注的重大健康问题。目前免疫治疗已成为癌症治疗最具前景的方法，包括免疫检查点阻断剂PD-1/PD-L1、CAR-T技术、溶瘤病毒和治疗性癌症疫苗成为免疫治疗开发的重点和热点领域，至今美国FDA已批准了一款治疗性癌症疫苗[Provenge(Sipuleucel-T)]、六款免疫检查点阻断剂[包括CTLA-4抑制剂Ipilimumab(Yervoy)；PD-1抑制剂Nivolumab(Opdivo)、Pembrolizumab(Keytruda)；PD-L1抑制剂Atezolizumab(Tecentriq)、Durvalumab(Imfinzi)和Avelumab(Bavencio)]、二款CAR-T技术产品[Yescarta 和Kymriah]和一款溶瘤病毒[talimogene laherparepvec(Imlygic)，T-Vec]用于临床，取得了良好的临床效果。然而，上述免疫治疗仅对少部分肿瘤有显著疗效，而在大多数肿瘤中并未显示明显优势，这显然与不同肿瘤生物学多样性和机体免疫系统的复杂性相关。

其中治疗性癌症疫苗一直是肿瘤免疫治疗领域研究的重点和热点之一。所谓治疗性癌症疫苗是指以治疗为目的的癌症疫苗，通常是通过诱导机体产生肿瘤特异性的主动性免疫反应来实现抗肿瘤效应。可通过多种手段或策略来达到目的，如各种肽疫苗、各种载体疫苗和以树突状细胞(Dendritic cells,DCs)为基础的瘤苗以及各种疫苗组件有机组合的瘤苗，如肽包被DCs、各类载体(RNA、DNA以及病毒载体)转染或感染DCs等，特别是其中的新抗原瘤苗，即利用肿瘤内突变基因编码的突变蛋白产生的多种抗原肽制备的治疗性瘤苗用于肿瘤患者的治疗，即便是个案或小样本的临床研究也呈现难以置信的临床治疗效果。然而，要诱导产生肿瘤特异性的主动性免疫反应，一个关键性环节就是体内的抗原递呈细胞(Antigen presenting cells，APCs)将肿瘤抗原肽递呈给T细胞识别。而DCs是目前已知的体内最强的 APCs，因此治疗性DC瘤苗在治疗性癌症疫苗中占有举足轻重的地位。

DCs的主要功能是摄取、加工、处理和呈递抗原，并将抗原信息传递给初始型T细胞，促使T细胞增殖、分化和激活成为能识别和杀伤肿瘤细胞的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，可见抗肿瘤免疫效应最重要的还是T细胞反应，而DCs则成为诱导这种肿瘤特异性T淋巴细胞反应最为关键的一环。例如2010年美国FDA批准的世界上第一个治疗性DCs瘤苗[Sipuleucel-T(Provenge)]，是一种前列腺癌疫苗，用于无症状或微小症状、去势抗性的转移性晚期前列腺癌的治疗，预示癌症免疫治疗时代的到来。继Sipuleucel-T获批后，近十年FDA 相继批准了近十款肿瘤免疫治疗相关的产品应用于临床。然而，也有失败的案例，如葛兰素史克(GSK)的MAGE-A3治疗性瘤苗(重组MAGE-A3蛋白加AS15免疫刺激剂，多次肌肉注射)在治疗非小细胞肺癌的III期临床研究(MAGRIT研究)并没有获得预期的效果而提前终止。尽管失败的原因不明，但治疗性DCs瘤苗的设计方面应该值得考虑，以期获得具有更好的临床治疗效果的治疗性癌症疫苗。