[发明专利]病理切片制作过程中一种新型的脱蜡方法

权利要求书

1.病理切片制作过程中一种新型的脱蜡方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1、取材：选择其体积大致为2cm×2cm×3mm；如果取动物的脑子等比较大的器官时，注意要当中切两下，这样会使福尔马林溶液完全浸透组织；

S2、固定：选择适量的固定液迅速固定动物新鲜的组织；

S3、脱水、透明、浸蜡：选择合适的脱水剂把S2固定后含有较多水分的组织脱水；选择不同浓度的酒精作为脱水剂，然后选择二甲苯作为酒精和石蜡相互作用的溶剂，该二甲苯也是最好的透明剂；用石蜡的目的是浸蜡来除去二甲苯，使得石蜡完全占据组织，便于后续的包埋；

S4、组织包埋：把脱水后的组织放入包埋专用的小铁盒内，注意组织下面的平整度，然后接一点石蜡，刚覆盖包埋盒就好，然后置于冷却板冷却；

S5、切片：所述切片包括初切和细切，该初切目的是让组织完全暴露在蜡块表面，初切的厚度一般可以选择40微米，初切完蜡块之后要把蜡块置于包埋机冷却板或者冰块里面；然后细切，细切的厚度一般可以选择3到5微米；细切的时候注意运用加湿器，这样切出来的组织片不会干的太厉害，挑选褶皱少的，相对很整齐的切片放入展片机内，展片机里面的水要用水温在40-45⁰C的蒸馏水；

S6、拷片：等组织片完全展开之后，用载玻片捞上来，注意捞的时候在组织片和载玻片之间尽量不要有水分，捞起来之后，要甩一甩，这样能使组织和载玻片之间的水分变得更少一些，把标记好的及甩完之后的载玻片放置在温度为60摄氏度的拷片机中烤干；

S7、脱蜡：选择石蜡——二甲苯——酒精——水的方法脱蜡或者一种新型脱蜡方法；

S8、染色：常用的染色方法为苏木素-伊红染色法，简称he染色，具体过程如下：

百分之零点五的苏木素四分钟；

百分之一的盐酸十五秒；

伊红十五秒，每次过程都要经过流水两到三分钟；

S9、最后一步吹干及封片。

2.根据权利要求1所述一种病理切片的制作方法，其特征在于：在S2中，所述固定液为百分之十的甲醛溶液或者百分之七十五的无水乙醇。

3.根据权利要求2所述一种病理切片的制作方法，其特征在于：所述甲醛溶液中的甲醛的浓度为百分之三十五到百分之四十。

4.根据权利要求1所述一种病理切片的制作方法，其特征在于：在S7中，所述石蜡——二甲苯——酒精——水的方法为：石蜡和水不相溶，脱蜡一般要溶于二甲苯和酒精，因为石蜡溶于二甲苯，二甲苯又溶于酒精，酒精又溶于水，所以这样逐级置换就能把石蜡和二甲苯完全置换出来；具体步骤如下：

先倒入同样浓度的二甲苯分两次；第一次二甲苯十分钟，第二次二甲苯十分钟；

然后就是倒入不同浓度的无水乙醇，无水乙醇依照次序：百分之百的无水乙醇一分钟；百分之百的无水乙醇一分钟；百分之九十五的无水乙醇两分钟；百分之九十五的无水乙醇两分钟；百分之八十的无水乙醇两分钟，最后流水冲洗。

5.根据权利要求1所述一种病理切片的制作方法，其特征在于：在S7中，该新型脱蜡方法仅有三步，并且所需时间很短；具体步骤如下：

把水烧至特定温度下；

把5毫升的特殊溶剂（环保材料，手可以直接触碰）置于一个小铁锅内，倒入刚烧的热水，把载玻片置于小铁锅内，定时相应时间；重复以上步骤；

最后流水冲洗；

该方法大大的缩短了脱蜡时间，并且在脱蜡过程中避免了使用二甲苯，省时环保。