[发明专利]mRNA疫苗递送载体及制备方法、mRNA疫苗及制备方法

权利要求书

1.一种mRNA疫苗递送载体，所述mRNA疫苗递送载体包括类脂分子A和类脂分子B，其特征在于，所述类脂分子A由溴壬烯和三氟甲基辛-2-烯-1-醇反应合成，所述类脂分子B由环二赖氨和三氟甲基1,2环氧十二烷反应合成。

2.根据权利要求1所述的mRNA疫苗递送载体，其特征在于，所述溴壬烯和三氟甲基辛-2-烯-1-醇的摩尔比为1:2，所述环二赖氨和三氟甲基1,2环氧十二烷的摩尔比为1:6。

3.一种mRNA疫苗递送载体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将溴壬烯和三氟甲基辛-2-烯-1-醇按照1:2的摩尔比混合，并加入过量的甲醇；再对混合后的溶液进行油浴加热，并控制反应温度为80℃，反应时间为48h；待反应结束后，对反应得到的产物进行旋蒸，旋蒸后得到油状混合物，该油状混合物即为类脂分子A；

(2)将环二赖氨和三氟甲基1,2环氧十二烷按照1:6的摩尔比混合，并加入过量的甲醇；再对混合后的溶液进行油浴加热，并控制反应温度为80℃，反应时间为48h；待反应结束后，对反应得到的产物进行旋蒸，旋蒸后得到油状混合物，该油状混合物即为类脂分子B；

(3)将所述类脂分子A、类脂分子B及稳定剂混合，即得到mRNA疫苗递送载体。

4.一种mRNA疫苗，其特征在于，包括编码特定抗原的mRNA和权利要求1或2所述的mRNA疫苗递送载体。

5.根据权利要求4所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述稳定剂包括二油酰磷脂酰乙醇胺、胆固醇和二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000。

6.根据权利要求5所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述mRNA疫苗递送载体中的类脂分子A和类脂分子B的总质量与所述二油酰磷脂酰乙醇胺、胆固醇及二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000的质量比为20:10:5:1。

7.根据权利要求6所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述mRNA疫苗递送载体中的类脂分子A、类脂分子B的质量与mRNA的质量比为48:112:1。

8.根据权利要求4所述的mRNA疫苗，其特征在于，所述mRNA编码流感抗原。

9.一种mRNA疫苗制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将类脂分子A和类脂分子B溶于浓度为10mg/ml的二甲基亚砜中，并加热至70℃，待其完全溶解至透明澄清状态；

(2)再向所述二甲基亚砜中加入mRNA、稳定剂，涡旋混匀；

(3)混匀后，将所述步骤(2)的混合物按二甲基亚砜与水为1:9的体积比滴加相应体积的无菌水，滴加完毕后再次涡旋混匀；

(4)静置一段时间，超滤去除二甲基亚砜，超滤时用无菌水进行洗涤，超滤后剩余液体即为所述mRNA疫苗。

10.根据权利要求9所述的mRNA疫苗制备方法，其特征在于，所述超滤时使用孔径为100kDa的超滤管进行。