[发明专利]一种优化的脐带血造血干细胞程控降温方法

权利要求书

1.一种优化的脐带血造血干细胞程控降温方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1，采集后的脐带血在24小时内进行制备分离，去除红细胞和血浆，保留富含造血干细胞的有核细胞成分，为脐带血标本；

S2，将所述脐带血标本和冷冻保护剂均置于4℃下预冷至少10分钟，再使用微量注射泵将冷冻保护剂加入到S1得到的脐带血标本中，添加过程中脐带血标本置于0-4℃的低温环境下，添加时长控制在10-15分钟，边加边使用摇床混匀；

S3，将程控降温仪箱体提前预冷至3℃，并在S2之后的20分钟内将添加了冷冻保护剂的脐带血标本放入金属保护盒中，然后再放入程控降温仪，开始程控降温，程控降温的程序设置如下：

S31，箱体温度3℃，等待3分钟；

S32，箱体温度-1℃/分钟箱体温度-11℃；

S33，箱体温度-50℃/分钟（21）至箱体温度-50℃（-17）；

S34，箱体温度15℃/分钟（17）至箱体温度-25℃（-17）；

S35，箱体温度-25℃等待3分钟；

S36，箱体温度-1℃/分钟至箱体温度-60℃；

S37，箱体温度-10℃/分钟至箱体温度-120℃；

S38，结束；

S4，经上述程控降温后的脐带血标本放入液氮中进行长期储存。

2.根据权利要求1所述的优化的脐带血造血干细胞程控降温方法，其特征在于，所述冷冻保护剂为二甲基亚砜和右旋糖苷40的混合物，且冷冻保护剂的添加体积为脐带血标本体积的1/4。

3.根据权利要求2所述的优化的脐带血造血干细胞程控降温方法，其特征在于，所述冷冻保护剂中二甲基亚砜的体积浓度为50%，右旋糖苷40的质量浓度为5%。