[发明专利]一种水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法在审
申请号: | 202010528875.4 | 申请日: | 2020-06-11 |
公开(公告)号: | CN111635928A | 公开(公告)日: | 2020-09-08 |
发明(设计)人: | 杨江华;张效伟 | 申请(专利权)人: | 南京易基诺环保科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/24 | 分类号: | C12Q1/24 |
代理公司: | 江苏瑞途律师事务所 32346 | 代理人: | 王琳琳;陈彬 |
地址: | 211100 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 水环境 dna 样品 采集 常温 干燥 储存 方法 | ||
1.一种水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)利用滤膜进行对水环境DNA样品进行过滤采集,所述的DNA样品被采集至滤膜;
2)在负压吸附的条件下依次利用异丙醇和乙醇对滤膜进行过滤处理;所述乙醇的用量为异丙醇用量的1.2~1.5倍;
3)将步骤2)处理后的滤膜风干后密封储存。
2.根据权利要求1所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:所述步骤2)中,异丙醇全部过滤完成后至乙醇过滤前仍保持负压吸附条件,持续0.5~1分钟。
3.根据权利要求1或2所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:步骤2)中,保持异丙醇的持续过滤时间至少为30秒,过滤完成后保持负压吸附条件0.5~1分钟,再保持乙醇的持续过滤时间至少为1分钟。
4.根据权利要求3所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:所述步骤3)中,密封储存方法具体为:将风干后的滤膜装入至填充有分子筛的密封储存管中保存。
5.根据权利要求4所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:所述密封储存管中还填充有变色硅胶。
6.根据权利要求5所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:所述步骤3)中风干温度为35~55℃,风干时间为2~10min。
7.根据权利要求5所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:所述密封存储管包括用于盛放滤膜(4)的管身(5)、置于管身(5)内部的镂空套管(2)以及用于密封管身(5)的管盖(1);所述镂空套管(2)内填充有分子筛和变色硅胶(3),所述镂空套管(2)的顶面与管盖(1)连接,并与管盖(1)形成一体化结构。
8.根据权利要求7所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:所述异丙醇为无水异丙醇,所述乙醇为无水乙醇,和/或所述滤膜为水系滤膜。
9.根据权利要求8所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:所述方法的运行利用负压过滤装置来实现,所述负压过滤装置包括负压泵、带有滤膜的水环境DNA样品过滤器以及连通管道,所述负压泵通过连通管道与带有滤膜的水环境DNA样品过滤器相连通,所述连通管道上设有泄压阀。
10.根据权利要求9所述的水环境DNA样品的采集及常温干燥储存方法,其特征在于:具体步骤如下:
(1)利用负压过滤装置进行水样过滤,水样过滤完成后,关闭负压泵,打开泄压阀;
(2)待压力为零后关闭泄压阀,向水环境DNA样品过滤器中加入无水异丙醇,再次开启负压泵进行过滤,过滤完成后,关闭负压泵,打开泄压阀;
(3)待压力为零后关闭泄压阀,向水环境DNA样品过滤器中加入乙醇,再次开启负压泵进行过滤,过滤完成后,保持负压泵处于开启状态,并利用风机对滤膜进行风干处理;
(4)处理完成后,将滤膜取下进行密封存储。
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