[发明专利]抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的shRNA及制备方法、引物与应用

权利要求书

1.抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的干扰性shRNA，其特征在于，所述干扰性shRNA依次包括靶序列、环形结构序列、靶序列的互补序列；

其中所述靶序列为GGAGUUCGAUGCCGUUAAGGA。

2.根据权利要求1所述的抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的干扰性shRNA，其特征在于，所述干扰性shRNA的序列结构如下所示：

3.一种如权利要求1-2任一项所述的抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的干扰性shRNA的制备方法，其特征在于，包括步骤：

根据靶基因的序列，设计出干扰性shRNA序列；

根据干扰性shRNA序列，设计一对引物序列；

利用所设计的一对引物，通过填充反应生成制备shRNA转录模板；

利用制备好的shRNA转录模板，通过体外转录的方式，制备得到干扰性shRNA。

4.根据权利要求3所述的抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的干扰性shRNA的制备方法，其特征在于，所述填充反应体系包括：所设计的一对引物、dNTPs、DNA聚合酶。

5.根据权利要求3所述的抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的干扰性shRNA的制备方法，其特征在于，所述体外转录体系包括：shRNA转录模板、T7 RNA聚合酶缓冲剂、NTPs、T7RNA聚合酶。

6.根据权利要求3所述的抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的干扰性shRNA的制备方法，其特征在于，所述引物序列为：

上游引物序列P1：

5’TAATACGACTCACTATAGGAGTTCGATGCCGTTAAGGACTTGCTTC3’；

下游引物序列P2：

5’AAGGAGTTCGATGCCGTTAAGGA GAAGCAAG3’。

7.一种用于制备如权利要求1-2任一项所述的抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的干扰性shRNA的引物，其特征在于，所述引物序列为：

上游引物序列P1：

5’TAATACGACTCACTATAGGAGTTCGATGCCGTTAAGGACTTGCTTC3’；

下游引物序列P2：

5’AAGGAGTTCGATGCCGTTAAGGA GAAGCAAG3’。

8.一种如权利要求1-2任一项所述的干扰性shRNA在制备用于抑制黄曲条跳甲精氨酸激酶蛋白表达的药物中的应用。