[发明专利]一种银杏叶的检测方法

说明书

本发明涉及一种银杏叶的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：取银杏叶供试品进行检测，该检测的色谱条件包括：色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18 3.0×50mm，1.8μm；流动相：0.1％甲酸‑甲醇(A)：0.1％甲酸‑水(B)，所述检测的洗脱梯度为0‑3min：25％‑95％A；3‑6min：95％A；6‑7min：95％‑25％A；7‑8min：25％A。经方法学考察，确认本发明技术简便、快速、准确，可在短内完成多种指标成分的检测，是测定银杏叶多指标成分含量的有效手段。

技术领域

本发明涉及检测方法，特别涉及一种采用液相色谱串联三重四极杆质谱法测定银杏叶的方法。

背景技术

银杏叶为银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L.)的干燥叶。性甘、苦、涩、平，归心、肺经，具有活血化瘀、通经活络、敛肺平喘、化浊降脂等作用。银杏叶作为中药材，已广泛地运用到各类制剂产品中，主要用于冠状动脉性心脏病、心绞痛、高血脂等疾病的治疗。

银杏内酯是银杏叶(Ginkgo leaf)中主要的有效成分之一，其结构主要为二萜和倍半萜类结构，是目前为止发现的唯一拥有叔丁基官能团的天然物质。研究表明，该类成分可特异性拮抗血小板活化因子(PAF)受体。银杏叶中常见的银杏内酯有银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯、银杏内酯J。银杏内酯类化合物的含量，对银杏叶制剂的疗效和内在质量起着关键的作用，而且是银杏叶及其提取物和植物药质量控制的重要依据。

银杏酸(ginkgolic acids，GA)是银杏叶中主要的毒性物质，具有致敏性、胚胎毒性、细胞毒性及免疫毒性。也是引起临床不良反应的主要物质，具致敏性和致突变毒性。其中，银杏叶中具有多种银杏酸，而银杏酸的限量是评价银杏叶制剂质量的关键指标之一。

目前已有银杏叶中银杏内酯类成分、银杏酸类成分的检测方法。对于银杏内酯类成分，因其紫外吸收较差，在检测时易受干扰，目前多采用高效液相色谱与蒸发光散射检测器(ELSD)联用法检测，但蒸发光散射检测器灵敏度低，目前多用于银杏叶提取物及制剂中银杏内酯类成分的检测。对于银杏酸类成分，目前主要采用高效液相色谱与二极管阵列检测器(DAD)联用法检测，多以白果新酸及银杏总酸作为对照，以此计算银杏叶及其制剂中银杏酸的含量，并不能反映出各类银杏酸在银杏叶及其制剂中的实际存在情况。并且分别检测两类成分需要进行不同的前处理，过程繁琐耗时，因此有必要采用灵敏度高的检测手段，建立一种可以同时测定银杏叶及其制剂中银杏内酯、银杏酸含量的快速、简便的方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有的技术存在的上述问题，提供一种通过HPLC-MS/MS法同时测定银杏叶中多指标成分含量的检测方法，本发明所要解决的技术问题是如何简便、快速、灵敏的测定银杏叶中多指标成分的含量。

本发明的目的可通过下列技术方案来实现：一种银杏叶的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：取银杏叶供试品进行检测，该检测的色谱条件包括：

色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18 3.0×50mm，1.8μm；流动相：0.1％甲酸-甲醇(A)：0.1％甲酸-水(B)，所述检测的洗脱梯度为0-3min：25％-95％A；3-6min：95％A；6-7min：95％-25％A；7-8min：25％A。

进一步地，所述色谱条件还包括：柱温25～40℃，流速0.4～0.6mL/min。

具体地，所述色谱条件包括：柱温40℃，流速0.6mL/min，进样量：1μL。

进一步地，所述检测方法还包括对对照品溶液进行检测，该检测的色谱条件包括：