[发明专利]一种tiRNA-Val反义链抑制剂及其应用

说明书

本发明公开了一种tiRNA‑Val反义链抑制剂及其应用。本发明利用小鼠非酒精性脂肪肝炎模型，通过对肝组织进行tRFs测序，分析筛选得到表达水平比对照组显著上调的tiRNA‑Val。通过合成化学修饰的tiRNA‑Val反义链抑制剂，进行非酒精性脂肪肝炎小鼠体内实验，结果显示：抑制小鼠体内tiRNA‑Val后，肝功能指标ALT和AST下降；病理形态结果显示肝脏的油滴明显变小，并且数量也明显地减少；肝组织中的甘油三酯明显降低，血清TNF‑α水平降低。说明针对tiRNA‑Val，选择性进行有效干预，如利用tiRNA‑Val反义链抑制剂，可以改善脂代谢，减轻炎症反应，达到预防或减缓NASH的发生发展。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种tiRNA-Val反义链抑制剂及其应用。

背景技术

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是排除酒精及病毒等明确病因，一种肝脏从单纯脂肪变性(nonalcoholic fatty liver，NAFL)发展到脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)、脂肪性肝纤维化、肝硬化，甚至肝细胞癌的临床综合征。据预测，全球NAFLD成人患病率约25％，欧美发达国家为20％-40％。NAFLD早期表现为脂肪肝，其中约25％患者可进一步发展为NASH。除了与肝脏相关的发病率和死亡率，NAFLD还与几种其它肝外疾病如2型糖尿病、高脂血症等密切相关，危害大。值得注意的是，NAFL和NASH不仅在成人中存在，在儿童和青少年中也有很高的患病率。近年，随着人们生活方式、饮食习惯等改变，我国NAFLD发病率呈逐年上升趋势，已成为第二大慢性肝病。NASH是NAFLD的关键病理类型，进一步恶化可进展为肝硬化，其预后较差，严重威胁人类健康。

NASH的发病机制比较复杂，影响疾病进展的因素较多。目前“多重打击学说”的发病机制理论比较流行，然而大家比较认可、影响比较大的理论是“二次打击学说”：“第一次打击”指脂代谢紊乱等原因导致的肝细胞脂质蓄积所造成的损伤；而“二次打击”是指脂质过氧化、氧化应激反应等引发肝细胞损伤、炎症因子释放，进而导致肝细胞凋亡和肝组织炎症、纤维化的发生。Grohmann等研究揭示了肥胖相关的肝脏氧化应激可作为独立因素导致NASH的发病。Kim等报道内质网应激可上调Caspase-2表达，激活site 1 protease(S1P)促进脂肪生成和促进NASH进展。多项研究表明氧化应激、内质网应激、脂毒性、线粒体功能障碍和免疫细胞活化等参与非酒精性脂肪肝的发病进程。其中，氧化应激在肝损伤中可能起主要作用，氧化应激的程度与NAFLD的严重程度密切相关。据报道，在NAFLD患者中，细胞色素P4502E1(Cyp2e1)活性及表达水平都明显上调；而且在NASH模型中，肝脏CYP2E1升高水平和过氧化氢及脂质过氧化水平成正相关。CYP2E1可催化产生ROS，造成脂质过氧化。在NAFL模型中，过表达Cyp2e1导致氧化应激增加。ROS积累、氧化应激等可诱导肝细胞线粒体功能障碍，而线粒体功能受损是驱动肝脏脂肪变性发展为NASH的中心环节。此外，氧化应激和脂质过氧化可以导致肝细胞、Kupffer细胞和脂肪细胞释放肿瘤坏死因子(TNF-α)、转移生长因子(TGF-β1)和白细胞介素8(IL-8)等细胞因子，参与肝细胞坏死、炎症及纤维化的发病，进一步损害单纯脂肪肝，使其向NASH发展。这些研究结果说明氧化应激在NASH进展中起关键作用。迄今为止，NASH的发病机制仍未阐明，缺乏有效治疗药物，探究其发病机制，寻找新的防治策略意义重大。