[发明专利]一种基于Trinder反应的检测试剂盒及其应用在审
申请号: | 202010542576.6 | 申请日: | 2020-06-15 |
公开(公告)号: | CN111808921A | 公开(公告)日: | 2020-10-23 |
发明(设计)人: | 梁艳;赵畅;龚婷;吴年芬;凡速朋;舒芹;张雪娇;赵愿安 | 申请(专利权)人: | 武汉生之源生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/62 | 分类号: | C12Q1/62;C12Q1/60;C12Q1/61;C12Q1/54;C12Q1/48;C12Q1/34;C12Q1/44;C12Q1/28;C12Q1/26;G01N21/31;G01N21/75 |
代理公司: | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人: | 易贤卫 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 trinder 反应 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种基于Trinder反应的检测试剂盒,由R1试剂和R2试剂组成,R1和R2试剂中包含催化待测物生成过氧化氢的酶,R1试剂中还含有缓冲液、防腐剂、过氧化物酶,R2试剂中含有缓冲液、防腐剂、过氧化物和色原底物,其特征在于,所述R1试剂中过氧化物酶的浓度为100~150KU/L,且R1试剂中还含有浓度为0.5~1g/L的4-氨基安替比林;
所述检测试剂盒可提高抗临床药物干扰的能力,所述临床药物包括:羟苯磺酸钙、酚磺乙胺、甲基多巴、左旋多巴、多巴胺中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的基于Trinder反应的检测试剂盒,其特征在于,所述R1试剂中还包括金属离子螯合剂和表面活性剂。
3.根据权利要求1所述的基于Trinder反应的检测试剂盒,其特征在于,所述R2试剂中,过氧化物酶的浓度为25~30KU/L。
4.根据权利要求1所述的基于Trinder反应的检测试剂盒,其特征在于,所述色原底物为苯胺类衍生物,所述苯胺类衍生物的浓度为1g/L。
5.根据权利要求4所述的基于Trinder反应的检测试剂盒,其特征在于,所述苯胺类衍生物为DHBS、TOOS、HDAOS、F-DAOS、DHBA、TOPS、ADOS、ADPS、ALPS、DAOS、MADB、MAOS、TODB中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的基于Trinder反应的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:肌酐检测试剂盒、甘油三酯检测试剂盒、总胆固醇检测试剂盒、游离脂肪酸检测试剂盒、糖化白蛋白检测试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇检测试剂盒、尿酸检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒、腺苷脱氨酶检测试剂盒、脂肪酶检测试剂盒、5’-核苷酸酶检测试剂盒。
7.一种提高Trinder反应检测抗干扰能力的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、在所述Trinder反应前加入过氧化物酶至终浓度为100~150KU/L,同时加入4-氨基安替比林至终浓度为0.5~1g/L,以去除待测物中的临床药物,其中所述临床药物可参与Trinder反应;
S2、在所述Trinder反应时加入可催化待测物生成过氧化氢的酶,同时加入过氧化物酶和苯胺类衍生物至终浓度分别为25~30KU/L和1g/L,以进行Trinder反应,生成显色物质;
S3、测定Trinder反应前后的吸光度以检测待测物浓度。
8.一种肌酐检测试剂盒,其特征在于,所述肌酐试剂盒由R1试剂和R2试剂组成,其中所述R1试剂包括:Good’s缓冲液100mmol/L、肌氨酸氧化酶20KU/L、肌酸脒基水解酶50KU/L、抗坏血酸氧化酶10KU/L、过氧化物酶150KU/L、4-氨基安替比林1g/L、HEDTA0.5g/L、Proclin3001g/L、GENAPOLX-08010g/L,pH为7.5;所述R2试剂包括:Good’s缓冲液50mmol/L、肌酐酰氨基水解酶300KU/L、亚铁氰化钾0.05g/L、叠氮化钠1g/L、过氧化物酶30KU/L、DHBS1g/L,pH为7.5。
9.一种游离脂肪酸检测试剂盒,其特征在于,所述游离脂肪酸检测试剂盒由R1试剂和R2试剂组成,其中所述R1试剂包括:磷酸盐缓冲液50mmol/L、过氧化物酶100KU/L、辅酶A4g/L、腺嘌呤核苷三磷酸6g/L、Proclin 3001g/L、4-氨基安替比林0.5g/L,pH为7.0;所述R2试剂包括:磷酸盐缓冲液50mmol/L、脂酰辅酶A氧化酶50KU/L、脂酰辅酶A合成酶5KU/L、过氧化物酶25KU/L、叠氮化钠1g/L、HDAOS1g/L,pH为7.0。
10.一种甘油三酯检测试剂盒,其特征在于,所述甘油三酯检测试剂盒由R1试剂和R2试剂组成,其中所述R1试剂包括:HEPES缓冲液50mmol/L、甘油激酶18KU/L、过氧化物酶130KU/L、磷酸甘油氧化酶18KU/L、胆酸钠5mmol/L、PC-3001g/L、4-氨基安替比林4mmol/L,pH为6.5;所述R2试剂包括:HEPES缓冲液50mmol/L、脂蛋白脂肪酶18KU/L、叠氮化钠1g/L、三磷酸腺苷0.15mmol/L、草氨酸0.05mmol/L、过氧化物酶30KU/L、DHBS1g/L,pH为6.5。
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