[发明专利]一种含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液及其制备方法

权利要求书

1.一种含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液，其特征在于，所述生发液包括外泌体组合物和辅料，所述外泌体组合物包括毛乳头细胞来源外泌体和包覆其中的胶原蛋白。

2.如权利要求1所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液，其特征在于，所述毛乳头细胞来源外泌体与胶原蛋白的质量比为(5-8):1；

优选地，所述毛乳头细胞来源外泌体为1-3代毛乳头细胞来源外泌体。

3.如权利要求1或2所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液，其特征在于，所述辅料与所述毛乳头细胞来源外泌体的质量比为(10-40):1，优选(15-20):1。

4.如权利要求1-3中任一项所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液，其特征在于，所述辅料包括稳定剂、保湿剂、头皮吸收促进剂或抗氧剂中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述辅料包括稳定剂、保湿剂、头皮吸收促进剂和抗氧剂的组合；

优选地，所述稳定剂、保湿剂、头皮吸收促进剂和抗氧剂的质量比为(2-10):(1-5):(1-5):1。

5.如权利要求4所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液，其特征在于，所述稳定剂包括透明质酸钠、羧甲基壳聚糖或羟乙基淀粉中的任意一种或至少两种的组合；优选透明质酸钠和羟乙基淀粉的组合；

优选地，所述保湿剂包括丙二醇和/或甘油；

优选地，所述头皮吸收促进剂包括月桂氮卓酮、二甲基亚砜或薄荷醇中的任意一种或至少两种的组合；优选二甲基亚砜和薄荷醇的组合；

优选地，所述抗氧剂包括柠檬酸、酒石酸或抗坏血酸中的任意一种或至少两种的组合。

6.如权利要求1-5中任一项所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液，其特征在于，所述外泌体组合物是由如下方法制备得到的：

(1)将毛乳头细胞来源外泌体与电转染缓冲液混合，制得第一溶液；

(2)将步骤(1)得到的第一溶液与胶原蛋白混合，进行电穿孔转导，制得第二溶液；

(3)将步骤(2)制得的第二溶液静置，洗涤，重悬，得到所述外泌体组合物。

7.如权利要求1-6中任一项所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液，其特征在于，所述外泌体组合物以纳米颗粒的形式存在，由如下方法制备得到：

(Ⅰ)将外泌体组合物经冷冻干燥制成外泌体组合物粉末；

(Ⅱ)将步骤(Ⅰ)得到的外泌体组合物粉末与碳酸二辛酯混合，制成油相溶液；将甘草甜素、椰油酰胺基丙基甜菜碱和水混合，制得水相溶液；

(Ⅲ)将步骤(Ⅱ)制得的油相溶液与水相溶液混合，并进行高速剪切乳化，制得初乳；

(Ⅳ)将步骤(Ⅲ)制得的初乳进行高压乳化，冷却，干燥，即得外泌体组合物纳米颗粒。

8.如权利要求7所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液，其特征在于，步骤(Ⅱ)所述外泌体组合物粉末在碳酸二辛酯中的浓度为25-35mg/mL；

优选地，步骤(Ⅱ)所述甘草甜素在水中的浓度为3-5mg/mL；

优选地，步骤(Ⅱ)所述椰油酰胺基丙基甜菜碱在水中的浓度为1-3mg/mL；

优选地，步骤(Ⅲ)所述油相溶液与水相溶液的体积比为1:(3-7)；

优选地，步骤(Ⅲ)所述高速剪切乳化的转速为1500-2000r/min，时间为30-40min；

优选地，步骤(Ⅳ)所述高压乳化的温度为40-50℃，压力为800-1000bar。

9.如权利要求1-8中任一项所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

将外泌体组合物、辅料和水混合，搅拌，得到所述含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液。

10.如权利要求9所述的含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将外泌体组合物、稳定剂、保湿剂、头皮吸收促进剂和水混合，搅拌，得到混合液；

(2)将步骤(1)得到的混合液与抗氧剂混合，搅拌，得到所述含有毛乳头细胞来源外泌体和胶原蛋白的生发液；

优选地，步骤(1)所述搅拌在4-10℃下进行，搅拌的时间为30-50min，搅拌的速度为200-400r/min；

优选地，步骤(2)所述搅拌是指先在15-25℃下搅拌10-15min，再升温至70-80℃下搅拌25-40min，搅拌的速度为600-800r/min。