[发明专利]木犀草素在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用

说明书

本发明公开了木犀草素在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用，木犀草素通过抑制嗜水气单胞菌主要毒力因子气溶素的活性而降低嗜水气单胞菌的毒力，从而达到降低该菌致病力的作用。进一步通过构建试验动物模型发现木犀草素对斑点叉尾鮰嗜水气单胞菌人工感染模型有显著的治疗作用，8天后的死亡率由95%降至30%。木犀草素为植物提取物，可从多种中药材中提取获得，对动物和人安全性较高，可以作为水产养殖用药物制剂和饲料添加剂应用于治疗和预防水产养殖动物的嗜水气单胞菌感染。

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及木犀草素在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用。

背景技术

木犀草素是一种黄酮类化合物，广泛分布于中药、蔬菜和水果中，是清热解毒类中药金银花和菊花的有效成分之一。现代药理研究发现，木犀草素具有多种生物学活性，如抗炎、抗肿瘤、抗氧化和神经保护功能等。作为其来源植物的金银花在我国大部分地区有分布，主要用于治疗外感风热或温病发热等症，已收入到中国药典。目前在临床中仍具有较多的应用。

嗜水气单胞菌是淡水水产养殖常见的一种条件性病原菌，此外还能感染陆生动物和人，是一种人-兽-鱼共患病原菌。嗜水气单胞菌对淡水养殖动物的致病范围十分广泛，可以导致多种鱼类、虾类、蛙类、鳖类等感染性疾病，是养殖鱼类腹水症和爆发性出血病的主要病原菌。嗜水气单胞菌对养殖鱼类的威胁极大，一旦感染其死亡率可达到80％甚至100％，短期内造成大量的鱼死亡，是池塘养殖的烈性病害。因此，加强对水产养殖环境中嗜水气单胞菌的控制对于淡水鱼类的健康养殖和动物性食品安全具有重要意义。化学抗菌药物是水产养殖业用于控制细菌性疾病的主要手段，长期不合理使用抗菌药物导致了耐药性嗜水气单胞菌菌株的产生，给嗜水气单胞菌感染的治疗带来困难。此外，化学抗菌药物的大量使用导致水产源动物性食品中兽药残留，给食品安全带来隐患。因此，全新机制的抗嗜水气单胞菌感染策略和抗感染药物亟待研发以应对耐药菌带来的种种问题。

气溶素是致病性嗜水气单胞菌分泌的一种成孔蛋白，是其主要的毒力因子，也是嗜水气单胞菌导致各种疾病的物质基础。气溶素具有溶血性、肠毒性和细胞毒性，是目前研究较多的成孔毒素之一。气溶素能结合到易感细胞的细胞膜上，形成带有孔道的七聚体，导致细胞内容物外流而引起细胞死亡。气溶素对多种动物的红细胞、上皮细胞敏感。因此，以气溶素为靶标的药物筛选对于耐药性嗜水气单胞菌感染的防控具有广阔前景和重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供了木犀草素在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用，木犀草素通过抑制嗜水气单胞菌气溶素的活性，减轻嗜水气单胞菌引起的细胞损伤，对斑点叉尾鮰嗜水气单胞菌感染模型有显著的保护作用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

木犀草素在抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染中的应用：经试验证实，当木犀草素浓度达到1μg/mL时其对气溶素的溶血活性有显著的抑制作用，达到2μg/mL以上时其对气溶素溶血活性具有极显著的抑制作用(p＜0.01)，但对嗜水气单胞菌的生长几乎没有影响；进一步发现1μg/mL木犀草素能显著抑制气溶素引起的A549细胞损伤；对感染嗜水气单胞菌的斑点叉尾鮰灌服25mg/kg剂量的木犀草素，12h使用一次，连续3天，可使其死亡率降低到30％，而阳性对照组死亡率为95％。

木犀草素为金银花和菊花等药用植物的主要化学成分，没有明显的毒副作用和残留，是一种理想的天然药物，可广泛用于制备抗水产养殖动物嗜水气单胞菌感染的中药制剂和饲料添加剂。

与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：使用剂量低，治疗效果好，不直接抑制病原菌的生长因此不容易使病原菌产生耐药性，主要成分为中药来源的天然药物，对鱼体、人及环境没有毒性作用，没有药物残留的风险。

附图说明

图1为木犀草素与嗜水气单胞菌168菌株共培养的生长曲线。

图2为木犀草素对气溶素溶血活性的影响。