[发明专利]复合拉曼探针及其制备方法、应用

说明书

本发明涉及一种复合拉曼探针及其制备方法、应用。该复合拉曼探针的制备方法，包括如下步骤：将增强拉曼纳米颗粒进行改性，使得所述增强拉曼纳米颗粒的表面的电荷呈中性或者与示踪剂的电性相同，得到改性的增强拉曼纳米颗粒；将所述改性的增强拉曼纳米颗粒与所述示踪剂混合，得到复合拉曼探针。上述复合拉曼探针及其制备方法、应用，增强拉曼纳米颗粒拉曼信号具有特异性，不会受到示踪剂分子的干扰，同时，增强拉曼纳米颗粒不会对示踪剂的检测产生干扰，进而所得到的复合拉曼探针能够实现精准拉曼定位和示踪剂定位功能，达到双示踪的目的。该制备方法工艺简单、适合大批量生产。

技术领域

本发明涉及纳米材料技术领域，特别是涉及一种复合拉曼探针及其制备方法、应用。

背景技术

癌症严重威胁人类的健康和生命安全，是死亡率较高的疾病之一。目前手术切除仍是治疗癌症的最有效方法之一。前哨淋巴结(Sentinel lymph node,SLN)是恶性肿瘤发生淋巴转移的第一站淋巴结，对恶性肿瘤区域淋巴结的转移情况及指导淋巴结清扫具有重要意义。前哨淋巴结活检技术被视为“过去10年间肿瘤外科最有影响的贡献和变化”。通过前哨淋巴结的活检可以在保证肿瘤安全性的同时，有效地避免了不必要的大范围淋巴清扫，减少了出血、神经损伤、淋巴水肿等诸多并发症。

因此，前哨淋巴结的精确定位对于进行前哨淋巴结活检是必不可少的一步。目前，前哨淋巴结示踪剂已经在乳腺癌手术中大量被使用。临床广泛应用于前哨淋巴结示踪的示踪剂按作用方法主要分为：染料法示踪剂、荧光示踪剂、放射性核素示踪剂。

临床上常用的染料淋巴结示踪剂主要有：亚甲蓝(Methylene Blue)、纳米碳(Carban Nano Particle)、异硫蓝(Isosulfan Blue)和专利蓝(Patent Blue)等。但是，亚甲蓝的靶向性差、易在较短时间内将次级淋巴结染色且有增加背景干扰的风险，因此术中留给医生的操作时间窗口比较短。同时还存在皮肤被蓝染和坏死的可能性及其他不良反应。而纳米碳不具备SLN靶向性、淋巴管墨染浅导致其可视性较差，且缺乏大样本前瞻性研究，作为示踪剂的价值有待进一步证实，目前专家不建议其作为临床常规应用。

荧光淋巴结示踪剂有吲哚青绿和亚甲蓝等。存在易在较短时间内迁移至次级淋巴结造成检出率降低、存在生物组织自发荧光造成的背景干扰、荧光材料稳定性差、存在荧光漂白现象、深部淋巴管及淋巴结不易显像、穿透力有限(通常小于1mm)、缺乏长期随访数据等缺点。

放射性核素淋巴结显像剂主要为碍99标记的胶体，其中有硫胶体、右旋糖苷、锡胶体和血清蛋白胶体等。放射性核素淋巴结显像技术是运用放射性核素标记一种易被淋巴系统吸收的水溶性胶体物质，在肿瘤周围局部注射后利用SPECT-CT机检查使引流淋巴系统选择性显像的方法。放射性核素淋巴结显像技术借助于放射性核素标记的胶体聚集于肿瘤区域淋巴结、显像淋巴结，从而指导临床治疗。常用的放射性核素有99mTc、125I和131I等。放射性显像剂主要有99mTc标记的硫胶体、99mTc标记的右旋糖酐、99mTc标记的白蛋白等，目前临床上使用较多的是99mTc标记的硫胶体或右旋糖酐。核素示踪剂具有良好的靶向性和可视性且操作简便、价格适中，但在实际应用过程中增加了质控环节，需核医学科的试剂制备、注射级大型ECT设备现象，还存在医源性核素污染及安全性等问题。

以上这些每种单一方法进行使用时，都存在着不同的缺点，导致前哨淋巴结定位不准确。因此，在目前乳腺癌手术的临床指南中(美国2017版本、欧盟2015版本、中国2017版本)都强烈建议使用双示踪技术--核素法加上染料法，从而来提供前哨淋巴结的定位准确性。但是目前的双示踪技术还是依赖于核素法，且同时两种示踪剂需要分别单独注射，易消耗更多的手术时间。

发明内容

基于此，有必要针对如何提高定位精度和使用方便等问题，提供一种复合拉曼探针及其制备方法、应用。

一种复合拉曼探针的制备方法，包括如下步骤：