[发明专利]一种柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法

权利要求书

1.一种柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)外植体采集：采集柄翅果实生幼苗的腋芽作为外植体；

(2)初代诱导培养：对腋芽进行消毒后进行诱导培养形成不定芽；

(3)继代增殖培养：对不定芽进行继代增殖培养；

(4)生根培养：对继代增殖培养后的不定芽进行生根培养，得试管苗；

(5)移植：将试管苗进行移植，得种苗。

2.根据权利要求1所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，先对腋芽用水冲洗，然后浸泡在乙醇中，再使用HgCI2消毒并用水冲洗；最后将使吸干腋芽表面水份并去除芽鳞，将芽尖和基部茎段接种到初代诱导培养基中培养25-35天。

3.根据权利要求2所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述初代诱导培养基的条件为：

1/2MS培养基，1.0-3.0mg/L核黄素，0.1-0.5mg/L PVP，0.05-0.1mg/L TDZ，0.01-0.1mg/L IBA，0.1-0.5mg/L活性碳，25-30g/L蔗糖，5.0-7.0g/L琼脂，pH值为5.4-5.8。

4.根据权利要求2所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述步骤(2)的培养条件为：温度25℃，无光培养。

5.根据权利要求1所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，将不定芽切成长1.5-2cm的茎段并接种到增殖培养基中培养20-30天。

6.根据权利要求5所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述增殖培养基的条件为：

1/2MS培养基，2.0-4.0mg/L核黄素，0.1-0.5mg/L PVP，0.1-0.5mg/L TDZ，0.05-0.1mg/L IBA，0.1-0.5mg/L活性碳，25-30g/L蔗糖，5.0-7.0g/L琼脂，pH值为5.4-5.8。

7.根据权利要求1所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述步骤(4)中，对继代增殖培养后的不定芽的基部切取2.0-3.0cm不定芽并接种到生根培养基中培养20-30天。

8.根据权利要求7所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述生根培养基的条件为：

1/2MS培养基，0.1-0.5mg/L IBA，0.5-1.0mg/L NAA，25-30g/L蔗糖，3.0-4.0g/L琼脂，pH值为5.4-5.8。

9.根据权利要求1所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述步骤(5)中，所述步骤(5)中，将试管苗移植至温室大棚中炼苗至少10天，然后再试管苗洗净根部的培养基移植于砖红壤、腐质土基质的混合土壤中栽培成苗即得柄翅果种苗。

10.根据权利要求1-9任一所述的柄翅果腋芽组织培养茎芽扩繁的方法，其特征在于：所述步骤(3)至步骤(4)的培养条件为：

温度25-28℃；光照强度2000-2500lx，光照时间为10-12小时/天；湿度60％-70％。