[发明专利]一种牛体外受精胚胎或牛克隆胚胎的培养液以及培养方法在审
| 申请号： | 202010555676.2 | 申请日： | 2020-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN111593020A | 公开（公告）日： | 2020-08-28 |
| 发明（设计）人： | 何牧仁 | 申请（专利权）人： | 草原和牛投资有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 董大媛 |
| 地址： | 010000 内蒙古自治区呼和浩特市和林格尔县盛乐经*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种牛 体外受精 胚胎 克隆 培养液 以及 培养 方法 | ||
1.一种牛体外受精胚胎或牛克隆胚胎的培养液，其特征在于，包括胚胎基础培养液和瘦素；所述瘦素在培养液中的浓度为1～80ng/ml。
2.根据权利要求1所述的培养液，其特征在于，所述瘦素在培养液中的浓度为5～12ng/ml。
3.根据权利要求1或2所述的培养液，其特征在于，所述瘦素在培养液中的浓度为10ng/ml。
4.根据权利要求1所述的培养液，其特征在于，所述胚胎基础培养液为合成输卵管液SOF。
5.根据权利要求4所述的培养液，其特征在于，所述合成输卵管液SOF，以水为溶剂，包括以下浓度的组分：NaC199.7mmol/L，KC17.16mmol/L，NaHCO325.07mmol/L，MgC12·6H2O0.49mmol/L，KH2PO41.19mmol/L，丙酮酸钠0.4mmol/L，乳酸钠3.3mmol/L，体积分数5％的胎牛血清，CaC12·6H2O 1.71mmol/L，体积分数1％的必需氨基酸和体积分数1％的非必须氨基酸。
6.一种牛体外受精胚胎或牛克隆胚胎的培养方法，包括以下步骤：将牛体外受精胚胎或牛克隆胚胎置于权利要求1～5任意一项所述的牛体外受精胚胎或牛克隆胚胎培养液中，在38.5℃，0.5％CO2、100％湿度条件下进行体外培养。
7.根据权利要求6所述的培养方法，其特征在于，所述牛体外受精胚胎或牛克隆胚胎为受精卵～8细胞期胚胎。
8.根据权利要求6或7所述的培养方法，其特征在于，所述体外培养的时间为4～7天。
9.根据权利要求6所述的培养方法，其特征在于，所述牛体外受精胚胎或牛克隆胚胎培养液的用量为0.08～0.12ng/每一枚胚胎。
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