[发明专利]一种快速检测减肥类保健食品中西布曲明的方法

权利要求书

1.一种快速检测减肥类保健食品中西布曲明的方法，其特征在于包括如下步骤：

A、取样，取样品，加入0.01M pH 7.4PBS中，沉淀或离心，得到上清液，作为待测液；

B、制备西布曲明抗体-荧光微球偶联物，将免疫荧光微球，EDC，NHS按1:1:1的比例投料，并加入500-1500倍质量的去离子水，活化，接着离心去除上清液,接着加入pH 7.4的0.01M PBS重悬，通过保护标记法将免疫荧光微球偶联至西布曲明抗体，标记完成后，西布曲明抗体-荧光微球偶联物离心去除上清液，加入复溶液重悬抗体-荧光微球偶联物，所述复溶液为含1％BSA、2％蔗糖、0.05％PEG20000、0.5％Tween-20、0.1％proclin300的0.01MpH 7.4PBS溶液，之后，在聚苯乙烯微孔中加入西布曲明抗体-荧光微球偶联物，冻干后作为反应杯；

C、制备荧光试纸条，将0.2mg/mL的西布曲明包被抗原划4条平行线于NC膜上，从上到下分别记为检测1线，检测2线，检测3线和检测4线，于30-40℃真空干燥6-20h，室温真空干燥8-16h，最后将吸水纸和NC膜贴在PVC底板上，并切成3-6mm宽的试纸条，并放在室温条件下真空干燥以备用；

D、确定试纸条最低检测出限，用不同浓度的西布曲明标准溶液滴加到检测卡上，记录检测1线，检测2线，检测3线，检测4线消失的浓度为标志参考浓度，其中仅检测1线刚好消失的浓度为试纸条的最低检测出限；

E、检测比对，取步骤A的待测液，加入到反应杯中，搅拌均匀，在不小于15℃的室温环境中反应3-10min，反应后上样，进行免疫层析分析；将聚苯乙烯微孔中的液体转移至检测卡的加样孔中，层析5-15min,用荧光手电筒照射后观察结果；当检测1线、检测2线、检测3线和检测4线同时显色，结果为阴性；当检测1线消失，结果为阳性。

2.根据权利要求1所述一种快速检测减肥类保健食品中西布曲明的方法，其特征在于所述步骤B中，在聚苯乙烯微孔中加入2μg西布曲明抗体-荧光微球偶联物，并以荧光微球质量计。