[发明专利]一种益生菌微胶囊及其制备方法

说明书

本发明提供了一种益生菌微胶囊及其制备方法，所述微胶囊以脂肪球膜蛋白为胶囊壁，所述益生菌为选自乳杆菌属、双歧杆菌属、肠球菌属、大肠杆菌属、芽孢杆菌属、丁酸梭菌属、酵母菌属中的一种或多种菌株。制备所述益生菌微胶囊的方法包括：脂肪球膜蛋白的富集，和益生菌微胶囊的制备。本发明通过富集脂肪球脂肪球膜蛋白作为胶囊壁包埋益生菌，增强益生菌对胃环境的耐受性，使其得以顺利到达肠道，发挥其益生功能。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种益生菌微胶囊及其制备方法。

背景技术

伴随我国经济社会快速发展，居民生活节奏加快、生活方式改变，居民胃肠道疾病和代谢性疾病等慢性疾病发病率逐年增高，严重危害居民健康。以改善人体微生态营养为目的的益生菌是公认的改善代谢综合征和慢性胃肠道疾病的有效手段。大量研究显示，益生菌作为人体肠道重要的生理菌，具有多种生理功能，包括改善人体肠道功能、减少肠道疾病、促进营养物质吸收、缓解乳糖不耐症、降胆固醇、调节免疫系统、预防癌症等，因此被广泛青睐。为获得这些功效，必须使益生菌在产品和宿主中都保持活性和代谢稳定，且达到一定数量（≥10⁷ cfu /mL）。然而，由于益生菌很难耐受胃酸pH 1.2的强酸性环境，在胃环境中菌的数量和活性显著下降，使最终定植于人体肠道中的活菌数低于理论上能够发挥益生功效的最小阈值。因此，益生菌的微胶囊包埋技术越来越受到人们的关注。

乳脂肪球膜是乳脂肪球特有的膜组分，它包裹在乳脂肪球表面，在乳中充当乳化剂和稳定剂，防止乳脂肪絮凝与聚合，也阻止乳中脂肪与酶的接触。乳脂肪球膜是由极性脂质、胆固醇和膜特异性蛋白等组成的复杂体系，其中膜特异性蛋占25-70%，含500多种蛋白质，其中大多数为糖基化蛋白，包括嗜乳脂蛋白、黄嘌呤氧化还原酶、黏液素等等。近年来，脂肪球膜蛋白被发现具有免疫调节、抑菌、抗肿瘤和调节肠道菌群等益生功能，因此受到广泛关注。

发明内容

本发明的目的是提供一种益生菌微胶囊及其制备方法，通过富集脂肪球膜蛋白作为乳化剂包埋益生菌，增强益生菌对胃环境的耐受性，使其得以顺利到达肠道，发挥其益生功能。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种益生菌微胶囊，包括益生菌和胶囊壁，所述胶囊壁的原料为脂肪球膜蛋白。

进一步的，所述益生菌为选自乳杆菌属、双歧杆菌属、肠球菌属、大肠杆菌属、芽孢杆菌属、丁酸梭菌属、酵母菌属中的一种或多种菌株。

一种益生菌微胶囊的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，脂肪球膜蛋白的富集：

以Lacprodan MFGM-10为原料，将Lacprodan MFGM-10与三氯甲烷/甲醇混合，低温搅拌，搅拌后的液体与氯化钠混合振荡后平衡，分为上层相和下层试剂层，上层相分别用三氯甲烷/甲醇混合液、氯化钠溶液清洗，得到上层相组分；将去除脂质的下层试剂用旋转蒸发仪蒸发，提取重复2-3次，得到下层相组分，所述上层相组分和下层相组分混合，得到蛋白组分P1；

将所述蛋白组分P1溶于模拟乳超滤液中，添加凝乳酶，调节pH至6.8，凝乳后将酪凝块切成小块，收集排出的乳清液，得到蛋白浓缩液P2；

采用陶瓷膜超滤法去除所述蛋白浓缩液P2中的乳清蛋白，收集截留物，即得到脂肪球膜蛋白富集物；

步骤2，益生菌微胶囊的制备：

将脂肪球膜蛋白富集物分散至超纯水中搅拌形成脂肪球膜蛋白悬浮液，将所述悬浮液的pH调至7.0，低温下搅拌过夜，将益生菌浓缩液与悬浮液混合，制成含益生菌的蛋白-细胞混合物；

将谷氨酰转氨酶添加到所述含益生菌的蛋白-细胞混合物中，温度控制在30-50℃，并立刻加入已经预热的油中，搅拌1-3小时，使球膜蛋白胶连，再轻微离心将油从凝胶的微胶囊中分离出来，去除上清液，将沉淀物用Ringer平衡盐溶液稀释，摇匀，然后再次离心，去除上清液，沉淀物即为所述的益生菌微胶囊。

本发明益生菌微胶囊的用途，包括以下方面：