[发明专利]一种益生菌脂质体及其制备方法

说明书

本发明提供了一种益生菌脂质体及其制备方法，所述益生菌脂质体包括益生菌和脂肪球膜磷脂脂质体，以脂肪球膜磷脂、胆固醇、吐温‑80和维生素E，和/或壳聚糖为制备脂质体的原料。制备时，首先将脂肪球膜磷脂、胆固醇、吐温‑80和维生素E混合，混合物在无水乙醇中充分溶解，利用真空旋转蒸发去除有机溶剂，再通过真空干燥获得磷脂薄膜；利用PBS磷酸缓冲液稀释益生菌浓缩液，而后与上述磷脂薄膜在超声的作用下水合，从而获得所述益生菌脂质体。本发明通过制备脂肪球膜磷脂脂质体包埋益生菌，增强了益生菌对胃环境的耐受性，使其得以顺利到达肠道，发挥其益生功能；利用壳聚糖包被所述益生菌脂质体，可防止磷脂被氧化，进一步增加脂质体的贮藏稳定性。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种益生菌脂质体及其制备方法，以脂肪球膜磷脂脂质体装载益生菌。

背景技术

伴随我国经济社会快速发展，居民生活节奏加快、生活方式改变，居民胃肠道疾病和代谢性疾病等慢性疾病发病率逐年增高，严重危害居民健康。以改善人体微生态营养为目的的益生菌是公认的改善代谢综合征和慢性胃肠道疾病的有效手段。大量研究显示，益生菌作为人体肠道重要的生理菌，具有多种生理功能，包括改善人体肠道功能、减少肠道疾病、促进营养物质吸收、缓解乳糖不耐症、降胆固醇、调节免疫系统、预防癌症等，因此被广泛青睐。为获得这些功效，必须使益生菌在产品和宿主中都保持活性和代谢稳定，且达到一定数量（≥10⁷ cfu /mL）。然而，由于益生菌很难耐受胃酸pH 1.2的强酸性环境，在胃环境中菌的数量和活性显著下降，使最终定植于人体肠道中的活菌数低于理论上能够发挥益生功效的最小阈值。因此，益生菌的微胶囊包埋技术越来越受到人们的关注。

乳脂肪球膜是乳脂肪球特有的膜组分，它包裹在乳脂肪球表面，在乳中充当乳化剂和稳定剂，防止乳脂肪絮凝与聚合，也阻止乳中脂肪与酶的接触。乳脂肪球膜是由极性脂质、胆固醇和膜特异性蛋白等组成的复杂体系，其中极性脂质约占膜的40%，由磷脂酰乙醇胺及乳脂肪特有的鞘磷脂和神经节甘脂等构成。近年来，脂肪球膜磷脂被发现具有改善婴幼儿大脑和认知发育，增强免疫力，促进肠道发育、调节脂代谢等益生功能，因此受到广泛关注。

发明内容

本发明的目的是提供一种益生菌脂质体及其制备方法，通过富集脂肪球膜磷脂作为脂质体材料包埋益生菌，增强益生菌对胃环境的耐受性，使其得以顺利到达肠道，发挥其益生功能。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种益生菌脂质体，包括益生菌和脂质体，所述脂质体为脂肪球膜磷脂脂质体，以脂肪球膜磷脂、胆固醇、吐温-80和维生素E为原料制备所述脂质体。

进一步的，制备所述益生菌脂质体的原料还包括壳聚糖。

进一步的，所述益生菌为选自乳杆菌属、双歧杆菌属、肠球菌属、大肠杆菌属、芽孢杆菌属、丁酸梭菌属和酵母菌属中的一种或多种菌株。

所述益生菌脂质体的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，磷脂薄膜的制备：将脂肪球膜磷脂、胆固醇、吐温-80和维生素E以一定的比例混合，混合物在无水乙醇中充分溶解，而后利用真空旋转蒸发去除有机溶剂，再通过真空干燥获得磷脂薄膜；

步骤2，益生菌的包埋：利用PBS磷酸缓冲液稀释益生菌浓缩液，而后与步骤1得到的磷脂薄膜在超声的作用下水合，从而获得所述益生菌脂质体。

进一步的，所述制备方法还包括以下步骤：

将步骤2制备好的益生菌脂质体与等体积的壳聚糖溶液混合，持续搅拌，并在高压匀浆器中进行匀浆处理，得到壳聚糖包被的益生菌脂质体。

进一步的，所述脂肪球膜磷脂、胆固醇、吐温-80和维生素E的质量比为6：1：18：0.12。

本发明益生菌脂质体的用途，包括以下方面：

本发明所述的益生菌脂质体用于制备食品添加剂。