[发明专利]用于检测退变椎间盘微血管形成的生物标志物及其检测方法

说明书

本发明涉及两种用于分析退变椎间盘微血管形成的标志物和检测方法。这两种标志物是血红蛋白及其辅基血红素。本发明的有益效果在于首次发现血红蛋白和血红素在人退变椎间盘组织中的表达丰度显著高于在正常椎间盘组织中的表达，本发明提供了一种从血管性改变的角度理解椎间盘退变的新思路(传统的观点多集中于椎间盘的钙化和纤维化过程)，并为此提供了两种可靠的生物标志物。

技术领域

本发明涉及生物医药检测技术领域，具体涉及一种用于检测退变椎间盘微血 管形成的生物标志物及其检测方法。

背景技术

椎间盘各部分(髓核、纤维环及软骨终板)的生理性退变(degeneration)是椎 间盘退行性疾病发生的根源。椎间盘是人体最大的无血管封闭结构，正常成人 的软骨终板和纤维环通过渗透这种特殊方式向髓核提供营养，随着年龄的增 长，软骨终板钙化的进行性发展导致椎间盘营养发生障碍，从而启动椎间盘的 退变进程。因此，探索椎间盘退变的生物标志物(biomarker)以及其中的机制是 脊柱外科的重要研究方向，具有重大的科学意义和深远的应用前景。

临床病理学家早已观察到椎间盘退变过程存在“微血管形成”的现象。新生 儿椎间盘软骨终板及纤维环内均可见丰富的血管，出生后血管管腔被细胞外基 质填充而逐渐闭塞。随着年龄增长，椎间盘内的微血管逐渐退化至终板和纤维 环外层，至成人阶段椎问盘成为人体最大的无血管封闭组织，其营养供应依赖 于软骨终板和纤维环的渗透作用。在椎间盘的退变过程中，髓核发生裂解和皱 缩，椎间盘内又再一次出现微血管形成，成为椎间盘退变的一种特征性的病理 改变。椎间盘内微血管形成可能是椎间盘损伤后的一种修复过程，同时具有促 进退变的作用。

然而，医学界对退变椎间盘微血管形成的研究还相当有限，更没有发现任何 一种可靠的生物标志物来预测退变椎间盘内是否有微血管形成。

因此，本领域迫切需要开发一种针对椎间盘退行性疾病的患病风险评估方法 和诊断方法。

发明内容

本发明的目的就是提供一种针对椎间盘退行性疾病的患病风险评估方法和 诊断方法。

本发明的另一目的是提供一种用于检测退变椎间盘微血管形成的方法。

在本发明的第一方面，提供了一种生物标志物集合的用途，用于制备一试剂 盒，所述的试剂盒用于：(I)评估待测对象的椎间盘退行性疾病的患病风险，和/ 或(II)待测对象的椎间盘退行性疾病的诊断；

其中，所述的集合中包括选自下组的生物标志物：血红蛋白、辅基血红素， 或其组合。

在另一优选例中，所述的试剂盒用于：

(i)检测待测对象的椎间盘组织微血管生成；

(ii)诊断待测对象的椎间盘退变；和/或

(iii)对椎间盘退行性疾病的临床病理分级鉴定。

在另一优选例中，所述生物标志物集合还包括：血管内皮标志物。

在另一优选例中，所述的血管内皮标志物为CD31。

在另一优选例中，所述试剂盒中包括：对所述集合中的各生物标志物具有特 异性的结合分子、特异性抗体、特异性扩增引物、特异性探针或芯片、同位素、酶 -底物复合物，或其组合。

在另一优选例中，所述试剂盒中包括：(i)血红蛋白的特异性结合分子、血红 蛋白的特异性抗体、特异性扩增引物、探针或芯片，或其组合；和/或(ii)血红素的 特异性探针、血红素过氧化物酶活性检测试剂，或其组合。

在另一优选例中，所述的评估或检测包括步骤：

(a)提供一来源于待测对象的待测样品，对样品中所述集合中各个生物标记物 的水平进行检测；