[发明专利]苦荞来源的鼠李糖基转移酶及其编码基因和应用

说明书

本发明公开了苦荞来源的鼠李糖基转移酶及其编码基因和应用。本发明通过差异RNA‑Seq筛选从苦荞中获得了鼠李糖基转移酶及其编码基因(FtRT1基因)。GUS染色结果发现，本发明所获得的FtRT1基因启动子具有启动子的活性，能够启动GUS报告基因的表达，且其表达受MeJA的诱导。本发明进一步构建农杆菌介导的苦荞毛状根遗传转化体系，FtRT1转基因毛状根总黄酮含量的测定结果表明，过表达苦荞株系中黄酮含量明显比对照组要高，证明FtRT1基因参与调控黄酮类物质的合成。本发明为生产具有重要临床需要的苦荞次生黄酮类物质提供了一种新的途径或方法。

技术领域

本发明涉及鼠李糖基转移酶及其编码基因，尤其涉及从苦荞中分离得到的鼠李糖基转移酶及其编码基因，本发明进一步涉及它们在调控荞麦中黄酮类物质的合成中的应用，属于苦荞鼠李糖基转移酶及其编码基因和应用领域。

背景技术

现代临床医学观察表明苦荞制品具有降血糖、降血脂、冠心病、抗癌、抗衰老等药用疗效，这些生物活性与苦荞中生物类黄酮抗氧化能力密切相关。作为一类常见的植物次生代谢物质，黄酮类化合物目前在自然界已发现约8000多种，主要包括查尔酮、黄酮、黄烷醇、原花青素、异黄酮和花青素六类。苦荞作为唯一一种富含生物活性黄酮的谷类作物，其广泛地应用于医疗制品和食品行业中。

苦荞中生物黄酮类物质芦丁含量极高且远高于甜荞。但是，目前在苦荞中各黄酮类化合物的代谢机理尚不清晰，尤其是关于芦丁、槲皮素和其他物质之间的糖基化反应仍属空白。迄今为止，还没有关于荞麦糖基转移酶基因克隆及其功能应用的报道。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种苦荞来源的鼠李糖基转移酶及其编码基因；

本发明所要解决的第二个技术问题将所述苦荞来源的鼠李糖基转移酶或编码基因应用于调控苦荞中黄酮类物质的合成。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

本发明首先公开了一种苦荞来源的鼠李糖基转移酶，其氨基酸序列为SEQ IDNo.1所示。

本发明分别以川荞1号的cDNA和DNA为模板，克隆得到FtRT1基因的CDS序列和启动子序列；该基因的CDS长度为1401bp，编码蛋白分子量51.84KDa的466个氨基酸，所编码蛋白的等电点(pI)为6.5。

本发明进一步公开了所述苦荞来源的鼠李糖基转移酶的编码基因，其多核苷酸序列为(a)或(b)或(c)所示：

(a)、SEQ ID No.2所示的多核苷酸序列；或

(b)、与SEQ ID No.2的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸序列，该多核苷酸编码的蛋白仍具有鼠李糖基转移酶的功能或活性；或

(c)、与SEQ ID No.2的多核苷酸序列至少有80％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有鼠李糖基转移酶的功能或活性；优选的，与SEQ ID No.2的多核苷酸序列至少有85％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有鼠李糖基转移酶的功能或活性；更优选的，与SEQ ID No.2的多核苷酸序列至少有90％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有鼠李糖基转移酶的功能或活性。

本发明还提供了所述鼠李糖基转移酶的编码基因的启动子，其多核苷酸序列为SEQ ID No.3所示。

本发明还公开了含有所述鼠李糖基转移酶的编码基因的重组载体。所述重组载体为重组表达载体或重组克隆载体。

本发明还公开了含有所述鼠李糖基转移酶编码基因的重组宿主细胞或重组菌；其中，所述重组菌包括但不限于重组大肠杆菌。