[发明专利]一种作为诊断结直肠癌肝转移标志物的血浆miRNA组合

说明书

本发明涉及一种诊断结直肠癌肝转移标志物，包括人血浆中的miR‑96，miR‑99b和let‑7a，miR‑96和let‑7a在结直肠癌肝转移患者的血浆中表达量升高，miR‑99b在结直肠癌肝转移患者的血浆中表达量降低，血浆中的miR‑96，miR‑99b和let‑7a表达改变可以作为诊断结直肠癌肝转移的标志物的组合，miR‑96，miR‑99b和let‑7a被确定为将CRLM患者与CRC患者分离的强有力的诊断因素。

技术领域

本发明涉及一种属于结直肠癌诊断技术领域，具体涉及一种作为诊断结直肠癌肝转移标志物的血浆miRNA组合。

背景技术

大肠癌（CRC）是世界上第三大流行的恶性肿瘤，也是与癌症相关的死亡率的主要原因。大肠肝转移（CRLM）的发生是一个多因素，多步骤的过程。最初约20-25％的CRC患者被诊断为肝转移，而原发肿瘤切除后高达30％-50％的肝转移为患者。绝大多数CRLM患者的5年生存率较低，≤10％，不适合进行根治性切除手术。常见策略（例如腹腔镜检查，细针穿刺细胞学检查）和成像模式（例如增强型计算机断层扫描（CT），磁共振成像（MRI））都是侵入性的，高度并发症或典型症状或体征不足。由于CEA的局限性，我们迫切需要更有效的CRLM生物标志物。

MiRNA由短的（18–25个核苷酸）内源性非编码RNA组成，它们通过与3'非翻译区（UTR）的碱基修复结合，在转录后水平上调节靶基因的表达，从而增强了抑制翻译或信使RNA裂解。miRNA调节高达20％-30％的基因表达。通过调节生物学和病理过程，miRNA的改变和功能异常在癌变，转移和复发过程中起着至关重要的作用。研究表明，某些miRNA可能是CRC的预后标志物和治疗靶标，包括（miR-494，miR-224，miR-150，miR-181a和miR-181b）。在随后的研究中，血清中的miRNA-1290还被证明是CRC诊断和预后的潜在预测因子。在血浆中，包含miR-17的8-miRNA集可将大肠腺瘤与健康对照区分开，miR-141可用于预测IV期大肠癌。

大肠癌由于其引发远处转移，尤其是肝转移的能力而仍然是癌症相关死亡率的主要原因。筛选CRLM的有效诊断方法是生存的重点。研究澄清了血浆或血清中是否存在特定的miRNA，由于其稳定的性质，可以对其进行检测。血浆miRNA可能源自分泌性囊泡，坏死和凋亡性肿瘤细胞的主动释放。因此，血浆miRNA可以反映不同类型癌症组织中的肿瘤动态。因此，循环miRNA的新兴作用满足了当前的需求，并可以用作诊断和预后各种癌症（包括结直肠癌）的生物标志物。

发明内容

为了克服上述缺陷，本发明提供了一种作为诊断结直肠癌肝转移标志物的血浆miRNA。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种诊断结直肠癌肝转移标志物，包括人血浆中的miR-96，miR-99b和let-7a。

miR-96和let-7a在结直肠癌肝转移患者的血浆中表达量升高。

miR-99b在结直肠癌肝转移患者的血浆中表达量降低。

一种诊断结直肠癌肝转移的试剂盒，包括miR-96，miR-99b和let-7a。

本发明的有益效果是：本发明利用qRT-PCR分析用于检测血浆中差异表达的miRNA的组合，并证实这些miRNA确实存在差异并且可以用作潜在的结直肠癌肝转移诊断生物标记。结果发现结直肠癌肝转移患者血浆中的miR-96，miR-99b和let-7a表达改变可以作为诊断结直肠癌肝转移的标志物的组合，miR-96，miR-99b和let-7a被确定为将CRLM患者与CRC患者分离的强有力的诊断因素。 而且，在区分CRLM和CRC组时，由miR-96，miR-99b和let-7a组成的组合具有比任何单个miRNA更高的区分价值。

附图说明