[发明专利]一种生物颗粒型复合佐剂及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 202010566835.9 | 申请日： | 2020-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN111729080A | 公开（公告）日： | 2020-10-02 |
| 发明（设计）人： | 王建忠;王春凤;杨锐;杨桂连;杨文涛;姜延龙;康元环;黄海斌;石春卫 | 申请（专利权）人： | 吉林农业大学 |
| 主分类号： | A61K39/39 | 分类号： | A61K39/39;A61P37/04;A61K39/145;A61P31/16 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 130118 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生物 颗粒 复合 佐剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种生物颗粒型复合佐剂，其特征在于，包括乳酸菌的细菌样颗粒和鞭毛蛋白，所述乳酸菌的细菌样颗粒为乳酸菌肽聚糖骨架，所述鞭毛蛋白通过肽聚糖结合域PA基因，锚定展示于乳酸菌的细菌样颗粒的表面。
2.根据权利要求1所述的生物颗粒型复合佐剂，其特征在于，所述乳酸菌为乳酸乳球菌。
3.根据权利要求1或2所述的生物颗粒型复合佐剂，其特征在于，所述乳酸菌为乳酸乳球菌MG1363。
4.根据权利要求1所述的生物颗粒型复合佐剂，其特征在于，所述鞭毛蛋白为蜡状芽孢杆菌的鞭毛蛋白，所述蜡状芽孢杆菌的GenBank登录号为AE016877.1。
5.根据权利要求1所述的生物颗粒型复合佐剂，其特征在于，所述肽聚糖结合域PA基因为乳酸菌自身的肽聚糖水解酶AcmA的C-端细胞壁结合活性中心，由3个被异源序列间隔开的自溶素基序组成。
6.一种如权利要求1-5任一所述的生物颗粒型复合佐剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、构建包含肽聚糖结合域PA基因的重组鞭毛蛋白；
S2、表达纯化步骤S1得到的重组鞭毛蛋白；
S3、乳酸菌经过热酸处理得到只含有肽聚糖骨架的细菌样颗粒；
S4、步骤S2所得的重组鞭毛蛋白与步骤S3所得的细菌样颗粒共孵育，重组鞭毛蛋白通过肽聚糖结合域PA基因结合于细菌样颗粒表面，得到生物颗粒型复合佐剂。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述重组鞭毛蛋白与细菌样颗粒饱和结合，两者的结合量为130ug/U，1U＝2.5×109颗粒。
8.权利要求1所述的生物颗粒型复合疫佐剂在制备动物疫苗中的应用。
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