[发明专利]一种山莴苣苦素的制备方法

权利要求书

1.一种山莴苣苦素的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：

a、将毛菊苣根粉碎，以甲醇占比为70%的甲醇水，料液比控制在1:5，热回流提取1 h，反复提取三次提取液过滤后合并，通过减压浓缩后获得浸膏，将浸膏中加两倍体积的水，超声分散成悬浊液，再加入等体积的石油醚或正己烷脱脂3次，所得水相合并，加入等体积的乙酸乙酯萃取3次，所得乙酸乙酯层合并，减压浓缩，真空冷冻干燥，得到毛菊苣根提取物；

b、取一根反相C18制备色谱柱，规格为长度250 mm，内径80 mm，装填用填料粒径10 μm，所填填料质量800g，将反相中试C18色谱柱连在制备色谱仪上，调整流动相为甲醇-0.1%甲酸水混合物，其中甲醇占比为45%-80%，柱温控制在-10℃-10℃，平衡色谱柱15 min，待用，流速控制在180 mL/min，称取步骤a的得到的毛菊苣根提取物50-1000mg，用甲醇溶解备用，收集山莴苣苦素峰，在温度50℃条件下减压浓缩，真空冷冻干燥得到纯度92%山莴苣苦素10-198mg；

c、取200-300目硅胶36g，以二氯甲烷为溶剂，湿法填装长度为60cm，内径为10 cm的正相色谱柱，将步骤b中所获得纯度92%山莴苣苦素加1 mL甲醇溶解，上样至正相色谱柱，以体积比为13:1-15:1的二氯甲烷-甲醇、二氯甲烷-乙醇或二氯甲烷-异丙醇混合溶液；或以体积比为13:1-15:1的三氯甲烷-甲醇、三氯甲烷-乙醇或三氯甲烷-异丙醇混合溶液为流动相，洗涤色谱柱，收集含有山莴苣素的组分，使用高效液相色谱仪测定组分中山莴苣苦素的纯度，将含山莴苣苦素纯度98%的组分合并，在温度45℃下用旋转蒸发仪浓缩至干燥，获得纯度98%的山莴苣苦素8-175 mg。

2.根据权利要求1所述的山莴苣苦素的制备方法，其特征在于步骤b中使用填充填料质量为800 g的反相C18制备色谱的纯化过程中，毛菊苣根提取物的上样量为100mg-700mg。

3.根据权利要求1所述的山莴苣苦素的制备方法，其特征在于步骤b中流动相中甲醇体积的占比为55%-65%。

4.根据权利要求1所述的山莴苣苦素的制备方法，其特征在于步骤b中柱温范围为-5℃-5℃。