[发明专利]一种基于富氧空位CeO2

权利要求书

1.一种基于富氧空位CeO₂电致化学发光免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）纳米金功能化富氧空位CeO₂溶液的制备

首先，将摩尔质量为5 ~ 8 mmol的天冬酰胺完全溶解于40 ~ 60 mL超纯水并在在45 ~60 °C下搅拌15 min，然后加入摩尔质量为5 ~ 8 mmol七水合三氯化铈继续搅拌10 min，随后将获得物转移至体积为50 mL的聚四氟乙烯内衬的高温反应釜中，温度保持在160 ~ 180°C，反应24 ~ 48 h，随后冷却至室温， 所得到的固体离心洗涤多次后，在40 ~ 80 °C的真空干燥箱中干燥12 ~ 36 h，然后在360 °C下烧结1 ~ 3 h，得到亮黄色的CeO₂纳米颗粒，取质量为80 ~ 100 mg的产品溶于体积为10 mL超纯水中配成浓度为2 ~ 4 mg/mL的CeO₂溶液，加入1 mol/L的硼氢化钠溶液，超声3 h后，离心分离，洗涤干燥后，制得富氧空位CeO₂纳米材料；

制备浓度为2 ~ 4 mg/mL的富氧空位CeO₂溶液，加入体积为1 ~ 3 mL纳米金溶胶，震荡结合12 h后，离心分离，制得纳米金功能化富氧空位CeO₂溶液；

（2）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；

（3）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 ~ 4 mg/mL的纳米金功能化富氧空位CeO₂溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；

（4）滴加6 μL、浓度为100 μg/mL的CYFRA 21-1抗体溶液，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；

（5）滴加3 μL、质量分数为1 ~ 3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；

（6）滴加6 μL、一定浓度的 CYFRA 21-1标准溶液，37 °C下孵化0.5 ~ 2 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。