[发明专利]检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的试剂盒

说明书

本发明公开了检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的试剂盒，包括：检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的crRNA‑1、LbCas12a核酸酶、核酸检测探针、第一上游引物、第一下游引物、DNA Amplification试剂盒、水和1×NEbuffer^TM2.1；所述核酸检测探针为IAB‑TTATT‑BHQ‑1；第一上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；第一下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明的试剂盒能够快速、准确地对SFTS病原体核酸进行检测，具有检测特异性好、灵敏度高、可在室温下实现高灵敏检测、操作方便、快捷的优点。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域。更具体地,涉及检测发热伴血小板减少综合征(SFTS)病原体核酸的试剂盒。

背景技术

发热伴血小板减少综合征(SFTS)病原体感染者的主要临床表现为发热、消化道症状、血小板减少、白细胞减少、肝肾功能损害，部分感染者有出血表现。该病主要发生在丘陵、山区，患者以从事农业生产的成年农民为主，部分患者被蜱叮咬。常用的诊断方法往往是基于经验判断或是单个病原体的检测，基于症候群的常见病原整体检测的产品很少。为实现SFTSV的早期检测，开发低成本、准确、高效、快速地检测SFTS病原的诊断方法非常重要。

目前，在对发热伴血小板减少(SFTS)病原体检测中，金标准仍是实时荧光定量PCR(Real-time-PCR,RT-PCR)检测技术，其灵敏度和特异性都较高。使用实时荧光PCR检测，单是实时荧光PCR检测一般需要两小时左右。整个检测过程还包括采样、处理样本等步骤，通常总时长大于两小时。该方法的主要缺点在于检测花费时间长，进行PCR检测时需要依赖PCR仪或昂贵的实时定量PCR仪及其它多种配套设备。

因此亟需一种不需要昂贵的仪器，低成本的，并能够快速、准确地发热伴血小板减少综合征(SFTS)病原体病毒的灵敏度高的试剂盒。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的crRNA-1。

本发明的第二个目的是提供检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的crRNA-2。

本发明的第三个目的是提供检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的试剂盒。

本发明的第四个目的是提供第二种检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的试剂盒。

本发明的技术方案概述如下：

检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的crRNA-1，所述crRNA-1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的crRNA-2，所述crRNA-2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

第一种检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的试剂盒，包括检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的crRNA-1、LbCas12a核酸酶、核酸检测探针、第一上游引物、第一下游引物、 DNA Amplification试剂盒、水和1×NEbuffer^TM2.1；

核酸检测探针为IAB-TTATT-BHQ-1；

第一上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

第一下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；

第二种检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的试剂盒，包括检测发热伴血小板减少综合征病原体核酸的crRNA-2、LbCas12a核酸酶、核酸检测探针、第二上游引物、第二下游引物、 DNA Amplification试剂盒、水和1×NEbuffer^TM2.1；

核酸检测探针为IAB-TTATT-BHQ-1；