[发明专利]一种Pratensilin D化合物及其制备和应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，具体的说是一种(+)‑和(‑)‑Pratensilins D化合物及其制备方法和在制备抗菌药物及抗肿瘤药物中的应用。化合物的化学式为C₂₈H₂₂O₆N，具有S或R两种结构式的化合物，其结构式如下，本发明制备所得的(±)‑Pratensilin D类化合物来源于海洋链霉菌Streptomyces pratensis KCB‑132的发酵产物，采用微生物发酵的方法制备该化合物具有高效环保的特点。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体的说是一种(+)-和(-)-Pratensilins D化合物及其制备方法和在制备抗菌药物及抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

随着对普通环境中微生物资源的不断挖掘，从中发现新颖放线菌资源及生物活性物质的概率越来越低，菌种的大量重复发现和重复筛选导致了发现新的先导化合物的几率越来越低，难度越来越大。因此人们把研究逐渐转向一个新的方向——极端环境。极端环境中的微生物为了适应诸如低温、高碱、高盐、高渗、高压、干旱、无光等各种极端条件，其生长特性、营养需求、繁殖规律、细胞结构、膜结构、蛋白及酶的结构、核酸结构、基因表达调控等均与普通环境中的微生物有着巨大的差异。次生代谢是生物在长期的进化过程中对环境的适应机制之一，是自然选择的结果。生存于极端环境的放线菌，经过长期的进化选择，必然具有特殊的代谢类型，从而合成结构新颖、独特、生物活性广泛的次生代谢产物，这必然将极大地提高新颖药物先导化合物的发现几率，是发现具有生物活性的新结构天然产物的宝藏。

发明内容

本发明提供一种新生物碱类化合物及其制备方法，和在制备抗菌及抗肿瘤药物中的应用。

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：

一种(±)-Pratensilin D化合物，化合物的化学式为C₂₈H₂₂O₆N，具有S或R两种结构式的化合物，其结构式为

化合物的制备方法，将活化后的海洋链霉菌Streptomyces pratensis KCB-132于ISP2培养基中发酵培养，纯化后即为式一、式二所示化合物。

具体为：

1)将海洋链霉菌Streptomyces pratensis KCB-132划线接种于ISP2固体培养基上，28℃培养直至长出白色的孢子，取孢子体接种到液体培养基，28℃，150-220rpm/min，摇床培养8-12d收获发酵物，将发酵液经大孔吸附树脂洗脱，而后减压浓缩得总浸膏；

2)总浸膏经硅胶柱层析，以体积比为0:100-100:0的甲醇/二氯甲烷为洗脱液进行梯度洗脱，收集洗脱液体积比1:99的甲醇/二氯甲烷的洗脱组分，将收集的洗脱组分进行ODS反相柱层析，收集含60％有机醇的洗脱液的洗脱部分，浓缩，进行HPLC制备得到化合物Pratensilin D，再通过手性色谱柱进行拆分得到(+)-和(-)-Pratensilins D。

所述步骤1)中萃取是采用的有机溶剂为乙酸乙酯和/或正丁醇，优选为乙酸乙酯；

所述大孔吸附树脂洗脱采用的洗脱液为有机醇；其中，有机醇为甲醇、乙醇中的一种，优选为乙醇。

所述ODS反相柱层析的洗脱液为有机醇和水；其中，有机醇和水的体积比为0:100-100:0，所述有机剂为甲醇、乙醇或乙腈，优选为甲醇。

所述培养基为ISP2固体或液体培养基。

所述大孔吸附树脂柱，为弱极性或非极性的大孔吸附树脂，优选弱极性。

一种化合物的应用，所述化合物在作为抗肿瘤药物或先导化合物中的应用。