[发明专利]一种威氏海链藻TwPEPC1基因及应用和培育高产水稻的方法有效

专利信息
申请号: 202010573462.8 申请日: 2020-06-22
公开(公告)号: CN111647613B 公开(公告)日: 2021-11-26
发明(设计)人: 林拥军;陈太钰 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12N15/57 分类号: C12N15/57;C12N9/48;C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 北京高沃律师事务所 11569 代理人: 吕纪涛
地址: 430000 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 一种 威氏海链藻 twpepc1 基因 应用 培育 高产 水稻 方法
【权利要求书】:

1.一种威氏海链藻( Thalassiosira weissflogii ) TwPEPC1基因,其特征在于,所述威氏海链藻TwPEPC1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.权利要求1所述的威氏海链藻TwPEPC1基因在提高水稻产量中的应用。

3.一种利用权利要求1所述威氏海链藻TwPEPC1基因培育高产水稻的方法,其特征在于,包括:

(1)将权利要求1所述的威氏海链藻TwPEPC1基因电转化入大肠杆菌,扩大培养、抽提质粒,得到克隆质粒;

(2)用Kpn I单酶酶切所述步骤(1)的克隆质粒,获得克隆质粒基因片段,用Kpn I单酶酶切载体pC1300s,获得线性载体pC1300s,将所述克隆质粒基因片段构建于线性载体pC1300s中,得到转化载体,将所述转化载体导入农杆菌中,得到转化菌株;

(3)将步骤(2)所述的转化菌株侵染水稻愈伤组织,将侵染后的水稻愈伤组织培养,得到高产水稻。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述威氏海链藻TwPEPC1基因的获得方法包括:以威氏海链藻基因DNA为模板利用简并引物进行PCR扩增,得到威氏海链藻TwPEPC1基因。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述简并引物包括上游引物和下游引物;

所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;

所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述农杆菌包括农杆菌EHA105

7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述侵染包括:将所述水稻愈伤组织浸泡于OD600值为0.8~1.0的农杆菌悬液中25~35min。

8.根据权利要求3或7所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述水稻愈伤组织包括水稻胚性愈伤组织。

9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述水稻的品种包括中花11水稻。

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