[发明专利]瓜类细菌性果斑病菌Ⅱ型菌株快速免疫检测试纸条及其应用

权利要求书

1.瓜类细菌性果斑病菌II型菌株快速免疫检测试纸条，其特征在于：包括底板，底板的一面从上到下依次黏贴吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，所述检测垫以硝酸纤维素膜为基垫，硝酸纤维素膜上自上而下横向设置质控线和检测线，所述检测线位于质控线下方，检测线上包被有抗细菌性果斑病菌多克隆抗体1152，所述质控线上包被有羊抗小鼠IgG；所述金标垫上喷涂有纳米金标记的抗II型细菌性果斑病菌单克隆抗体；所述的抗II型细菌性果斑病菌单克隆抗体由杂交瘤细胞株BFB2019分泌产生。

2.根据权利要求1所述的瓜类细菌性果斑病菌II型菌株快速免疫检测试纸条，其特征在于：所述的吸水垫长16-18mm，宽4mm；检测垫长25mm，宽4mm；金标垫长5mm，宽4mm；样品垫长20-22mm，宽4mm，相邻各垫的交叠长度为1-3mm；所述的吸水垫为吸水板；所述的底板为纸板。

3.根据权利要求1所述的瓜类细菌性果斑病菌II型菌株快速免疫检测试纸条，其特征在于：所述检测垫上质控线于检测线的间距为4-6mm，检测线与硝酸纤维素膜上沿的间距为15-20mm。

4.根据权利要求1所述的瓜类细菌性果斑病菌II型菌株快速免疫检测试纸条，其特征在于：所述金标垫中所用的纳米金粒径为20-40nm；所述金标垫上每厘米喷涂长度所需的纳米金标记的抗细菌性果斑病菌单克隆抗体的用量为100-200ng；检测垫检测线上每厘米喷涂长度所需的抗细菌性果斑病菌多克隆抗体的用量为50-100ng。

5.权利要求1所述的瓜类细菌性果斑病菌II型菌株快速免疫检测试纸条的应用，其特征在于：应用方法如下：剪取适量样品于研磨袋中，将单面研磨袋的磨砂面沿中间对折，样品置于对折曲面中充分研磨，加入样品缓冲液2mL，混匀得到待测样品溶液；塑料滴管吸取待测液，滴入检测条加样端，平放，反应5-10分钟，根据检测线和质控线颜色判定结果。

6.权利要求5所述的瓜类细菌性果斑病菌II型菌株快速免疫检测试纸条的应用，其特征在于：所述的适量样品，是指叶片或果肉。当样品为叶片时，在病健交接处剪取约5mm*5mm大小的样品；当样品为果肉时，可在病部取约1立方厘米大小的果肉。

7.权利要求6所述的瓜类细菌性果斑病菌II型菌株快速免疫检测试纸条的应用，其特征在于：所述的待测样品溶液的用量为100-200μL，检测时间为5-10分钟。

8.权利要求6所述的瓜类细菌性果斑病菌II型菌株快速免疫检测试纸条的应用，其特征在于：试纸条检测特异性强，对细菌性角斑病菌等无交叉反应，且能够区分细菌性果斑病菌I型和II型菌株，即可以识别II型菌株不能识别I型菌株；试纸条灵敏度可达1×10⁶cfu/mL。