[发明专利]一种间充质干细胞因子的制备方法及其应用有效
申请号: | 202010580949.9 | 申请日: | 2020-06-23 |
公开(公告)号: | CN111759791B | 公开(公告)日: | 2023-10-27 |
发明(设计)人: | 高进权;张伟;李建;周克 | 申请(专利权)人: | 金紫晶(南京)生物医药技术有限公司 |
主分类号: | A61K8/99 | 分类号: | A61K8/99;A61K8/64;A61K8/19;A61K8/20;A61K8/23;A61K8/24;A61K8/34;A61K8/44;A61K8/49;A61K8/60;A61K8/67;A61Q19/00;A61Q19/02;A61Q19/08 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 崔立立 |
地址: | 210000 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 间充质 干细胞 因子 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,包括:当间充质干细胞融合度达到70%以上时,对其用氙灯照射后,再放入培养箱中培养,循环培养若干次后,收集包含有含量增多的间充质干细胞因子的上清液。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,所述氙灯照射照度为30000~50000lx,每次照射时间为1小时,所述培养箱为37℃、5%CO2培养箱,每次在37℃、5%CO2培养箱中培养时间为2小时,收集上清液A。
3.根据权利要求2所述的间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,包括将所述上清液A加入培养基,放入37℃、5%CO2培养箱中继续培养24小时,然后在30000~50000lx氙灯照射培养1小时,再放入37℃、5%CO2培养箱2小时,循环培养三次后,收集上清液B。
4.根据权利要求3所述的间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,将所述上清液B用0.22μm滤膜过滤后,加入终浓度8%的甘露醇,冻干保存。
5.根据权利要求1所述的间充质干细胞因子的制备方法,其特征在于,获得间充质干细胞包括如下步骤:
(1)采集脐带组织、清洗;
(2)去除动脉和静脉;
(3)剥离脐带中的华通氏胶,弃掉羊膜组织;
(4)将所述华通氏胶剪碎,加入培养液,放置37℃、CO2培养箱中进行原代培养。第三天再添加等量的培养液,之后每三天进行半换液;
(5)当细胞融合度达到30%时,换掉培养液继续培养。
6.根据权利要求1-5任意一项权利要求所述的间充质干细胞因子的制备方法制得的间充质干细胞因子作为护肤产品的活性成分的应用。
7.根据权利要求6所述的间充质干细胞因子作为护肤产品的活性成分的应用,其特征在于,包括间充质干细胞因子和溶媒,所述溶媒用于溶解间充质干细胞因子,并维持间充质干细胞因子活性。
8.根据权利要求7所述的间充质干细胞因子作为护肤产品的活性成分的应用,其特征在于,所述溶媒包括如下原料组分:辅料、氨基酸、维生素和酸碱平衡盐,所述氨基酸的浓度为5mg/L~1345mg/L,维生素的浓度为2mg/L ~53mg/L。
9.根据权利要求8所述的所述间充质干细胞因子作为护肤产品的活性成分的应用,其特征在于,所述氨基酸包括甘氨酸、丙氨酸、L-精氨酸盐酸盐、L-天冬酰胺、L-天门冬氨酸、L-胱氨酸盐酸盐、L-谷氨酸、L-组氨酸盐酸盐、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸盐酸盐、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸盐水化合物、L-缬氨酸中的一种或多种。
10.根据权利要求8所述的间充质干细胞因子作为护肤产品的活性成分的应用,其特征在于,
所述维生素包括抗坏血酸磷酸盐酯、氯化胆碱、D-泛酸钙、叶酸、烟酰胺、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素中的一种或多种;
所述辅料包括肌醇、人转铁蛋白、重组胰岛素全链、D-葡萄糖、乙醇胺、谷胱甘肽(还原)、丙酮酸钠;
所述酸碱平衡盐包括氯化钙、硫酸镁、氯化钾、碳酸氢钠、氯化钠、磷酸二氢钠。
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