[发明专利]四环素类抗生素多模板分子印迹磁性复合材料的制备及应用方法

权利要求书

1.一种四环素类抗生素多模板分子印迹磁性复合材料的制备方法，其特征在于，包括以下几个步骤：

(1)氧化石墨烯(GO)的制备。采用改进的Hummer法。量取250mL浓硫酸和50mL浓磷酸，二者混合，置于冰浴条件下。再称取5.0g鳞片石墨粉和35.0g高锰酸钾。先将石墨粉和酸混合，之后在维持温度小于10℃的条件下缓慢加入高锰酸钾。低温反应2h后，将水浴温度升高至35℃。反应12h后，往混合液中慢慢加入200mL冰块，控制水浴温度在95℃，反应1h。反应结束后冷却至室温，加入1L去离子水稀释，再加入双氧水，得到亮黄色混合液。之后使用稀释20倍的浓盐酸和乙醇洗涤产物，于60℃下真空干燥，得GO。

(2)磁性氧化石墨烯(MGO)的制备。将氧化石墨烯0.5g置于500mL烧杯中，加入250mL超纯水后，加密封膜密封超声1h。待氧化石墨烯充分分散后，加入7g七水合硫酸亚铁和8g九水合三氯化铁，超声使其充分混合溶解，后倒入500mL的三颈烧瓶中。通氮除氧30min，将烧瓶置于80℃的水浴锅中，加入适量氨水调节pH为10-11，保持氮气的通入，在80℃下机械搅拌30min。待反应完成后，待混合液冷却至室温，在外加磁场条件下分离合成产物。使用去离子水和无水乙醇分别洗涤三次，最后将所得产物于50℃下真空干燥12h，研磨后置于干燥器中备用。

(3)介孔二氧化硅包覆磁性氧化石墨烯(MGO@mSiO₂)的制备。称取磁性氧化石墨烯0.5g，将其充分分散于250mL去离子水与100mL无水乙醇的混合液中。称取十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)3g，将其与磁性氧化石墨烯混合液混合。加入5mL氨水，超声1h后，在机械搅拌条件下逐滴加入4mL正硅酸乙酯(TEOS)，室温下反应24h。使用磁铁收集反应产物，用无水乙醇洗涤三遍。采用1％硝酸铵乙醇溶液，于60℃下冷凝回流24h去除CTAB。后用乙醇洗涤三遍，然后在50℃下真空干燥。

(4)四环素类抗生素多模板分子印迹磁性复合材料的制备。分别称取0.01mmol土霉素、四环素、金霉素和强力霉素混合分散于50mL无水乙醇中，磁力搅拌使其分散均匀。滴加5mL去离子水，充分混合后，缓慢逐滴加入N-[3-(三甲氧基甲硅基)丙基]乙二胺(1.4mL)和苯胺基甲基三乙氧基硅烷(0.6mL)。匀速搅拌4h后，加入介孔硅包覆磁性氧化石墨烯(0.4g)，搅拌反应24h，反应完成后在外加磁场的作用下分离得到反应产物。用体积比为9/1的甲醇/乙酸混合溶液对反应产物进行洗涤，去除模板分子。待洗至洗脱液中无模板分子检出后，用甲醇洗去残留的乙酸，再将所得材料真空干燥。非印迹复合材料的合成除不加四环素类抗生素模板分子外，其它步骤均和印迹复合材料的相同。

2.一种如权利要求1所述制备方法得到的四环素类抗生素多模板分子印迹磁性复合材料用于去除和检测含四环素类抗生素的水样，其特征在于包括如下步骤：

(1)将50mg复合材料加到75mL含有一定浓度四环素类抗生素的水样中，调节pH为7，于恒温振荡器中200rpm条件下振荡吸附45min。

(2)在外加磁场作用下将吸附了四环素类抗生素的磁性复合材料从溶液中分离出来，然后加入1mL甲醇-乙酸(9∶1，体积比)混合溶液，于恒温振荡器中200rpm下振荡洗脱30min，再次进行磁分离，收集洗脱液。

(3)用高效液相色谱仪测定洗脱液中四环素类抗生素的浓度。