[发明专利]一种新生儿脐带、胎盘组织运输保护液及其制备方法和应用

说明书

本发明属于干细胞技术领域，具体涉及一种新生儿脐带、胎盘组织运输的保护液及其制备方法和应用。本发明提供的保护液由以下重量百分比的原料制成：PBS缓冲液10%‑35%，青霉素1‑5%，链霉素1‑5%，大环内酯类抗生素0.5‑1.0%，注射用人血白蛋白1‑5%，葡萄糖0.8‑1.2%，叶酸0.03‑0.06%，肌醇0.05‑0.09%，丙酮酸钠0.1‑0.3%，复方氨基酸30‑50%，肝素钠1‑3%，丹参0.6‑1.0%、川芎0.2‑0.8%，烟酰胺0.04‑0.07%、核黄素0.05‑0.09%，余量为水。通过加入本发明的保护液，可有效降低运输过程中污染的风险，有效保护组织块结构完整性，提高原代细胞的获得率及纯度。

技术领域

本发明属于干细胞技术领域，具体涉及一种新生儿脐带、胎盘组织运输保护液及其制备方法和应用。

背景技术

脐带和胎盘是胎儿的生命线，是胎儿与母体进行营养物质和代谢废物输送的唯一通道。脐带、胎盘和胎儿都是从同一个细胞--受精卵演变而来，其组织中含有丰富的多能干细胞。目前临床上已发现的可用脐带、胎盘间充质干细胞治疗的疾病有140余种，作为种子细胞它可应用于修复、替代受损或病变的多种组织器官，可用于治疗心脑血管疾病、神经系统疾病、骨组织病、自身免疫性疾病以及肝硬化、缺血性疾病等多种疾病。

新生儿来源的脐带、胎盘一般由医护人员采集，再运输到专用无菌实验室分离提取细胞。在整个运输过程中，样本存在着外源微生物污染风险。而且由于在体外长时间的运输，组织块脱离母体环境太久，缺乏足够的营养物质。组织细胞在营养与能量缺乏时，细胞内能量代谢会失衡，细胞会发生自噬，当受损细胞的积累率超过细胞自噬的清除能力，细胞能力过度消耗，ATP水平快速下降，细胞活性下降甚至死亡。这将直接影响其分离得到的脐带和胎盘原代细胞的质量和活力。

临床上为了解决上述难题，一般是在运输过程中加入一定体积的培养基及抗生素。中国专利CN108849857A公开了一种脐带间充质干细胞的运输保护液，在运输过程中加入了1％-3％硫酸链霉素溶液和80％-96％DMEM培养基水溶液，短时间内可以抑制外源微生物的污染。但对于长距离的组织样本运输，简单的培养基加抗生素，未能保护组织结构的完整性，原代细胞的提取要耗费更长的时间，原代细胞提取率也会降低。因此，如何维持离体脐带和胎盘组织的完整性和原代细胞的提取效率成为了首要解决的问题。

发明内容

为了克服现有技术中存在的技术问题，本发明的目的在于提供一种新生儿脐带、胎盘组织运输保护液及其制备方法和应用，以解决上述缺陷。

本发明提供了一种新生儿脐带、胎盘组织运输保护液，由以下重量百分比的原料制成：PBS缓冲液10%-35%，青霉素1-5%，链霉素1-5%，大环内酯类抗生素0.5-1.0%，注射用人血白蛋白1-5%，葡萄糖0.8-1.2%，叶酸0.03-0.06%，肌醇0.05-0.09%，丙酮酸钠0.1-0.3%，复方氨基酸30-50%，肝素钠1-3%，丹参0.6-1.0%、川芎0.2-0.8%，烟酰胺 0.04-0.07%、核黄素0.05-0.09%，余量为水。

优选地，一种新生儿脐带、胎盘组织运输保护液，由以下重量百分比的原料制成：PBS缓冲液20%，青霉素3%，链霉素3%，大环内酯类抗生素0.7%，注射用人血白蛋白3%，葡萄糖1.0%，叶酸0.04%，肌醇0.07%，丙酮酸钠0.2%，复方氨基酸40%，肝素钠2%，丹参0.7%、川芎0.5%，烟酰胺 0.05%、核黄素 0.07%，余量为水。

其中，所述大环内酯类抗生素包括克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉素其中的一种或几种。

进一步地，所述复方氨基酸包括L-盐酸精氨酸、L-盐酸胱氨酸、甘氨酸、L-盐酸组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-盐酸赖氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸其中的两种或多种。

本发明还提供了一种新生儿脐带、胎盘组织运输保护液的制备方法，包括以下步骤：