[发明专利]桑黄提取物的制备方法及应用

说明书

本发明提供了桑黄提取物的制备方法及应用。制备桑黄提取物的方法包括：称取桑黄粉末，加入20倍体积60％乙醇，加热，保持沸腾，回流提取1h，得到提取液；对所述提取液进行离心，得到上清液，减压干燥至干，即得所述桑黄提取物。本发明提供的桑黄药材60％醇提取物能够更好地抑制结肠癌细胞SW480的增殖，能够更好地诱导结肠癌细胞SW480的凋亡，诱导结肠癌细胞SW480形成不同程度的G2/M期阻滞，进而抑制癌细胞的增殖。

技术领域

本发明涉及中医药领域，具体地，涉及桑黄提取物的制备方法及应用。

背景技术

桑黄又称桑耳，是一种十分珍贵、寄生于桑属(Morus L.)植物木质基材的多年生大型药用真菌。曾经记载于明代李时珍的《本草纲目》中，善于治疗血崩、血淋、脱肛泻血、带下、经闭等症。目前桑黄栽培品在中日韩及部分欧洲国家，多用其防治多种癌症。由于结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是全球高发恶性肿瘤之一，因其死亡率较高，已经严重危害到人类的身体健康。结肠癌的发生原因较为复杂，与多种因素密切相关。对结直肠癌具有疗效的药物还有待研究。

发明内容

为了解决上述问题，本发明公开提供了一种制备桑黄提取物的方法，包括：称取桑黄样品，加入20倍体积60％乙醇，加热，保持沸腾，回流提取1h，得到粗液；对所述粗液进行离心，得到上清液，减压干燥至干，即得所述桑黄提取物。

在上述方法中，其中，所述离心包括以5000r/min离心5min。

本发明还提供了根据上述方法制备的桑黄提取物。

本发明还提供了上述桑黄提取物在抗结肠癌药物中的应用。

相对于桑黄药材水提取物和桑黄药材95％醇提取物，桑黄药材60％醇提取物能够更好地抑制结肠癌细胞SW480的增殖，能够更好地诱导结肠癌细胞SW480的凋亡，诱导结肠癌细胞SW480形成不同程度的G2/M期阻滞，进而抑制癌细胞的增殖。

附图说明

图1示出了三个桑黄提取物的单糖HPLC色谱图，其中，S1空白对照；S295％乙醇提取物；S360％乙醇提取物；S4水提取物；S5混合单糖对照品(色谱峰1-10依次为PMP、甘露糖、氨基葡萄糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖)。

图2示出了桑黄3个提取物对结肠癌细胞SW480增殖的抑制作用，其中，(a)水提取物；(b)60％醇提取物；(c)95％醇提取物(“*”表示p＜0.05；“**”表示p＜0.01)。

图3示出了桑黄2种醇提取物的细胞凋亡图，其中A1-A4为60％桑黄醇提取物；A1为对照组，A2-A4为醇提取物不同剂量组(3μg/mL，30μg/mL，300μg/mL)；B1-B4为95％桑黄醇提取物；B1为对照组，B2-B4为醇提取物不同剂量组(3μg/mL，30μg/mL，300μg/mL)。

图4示出了桑黄60％醇提取物对结肠癌细胞SW480周期阻滞情况图，A为对照组；B为加入提取物300μg/mL；C为加入提取物30μg/mL；D为加入提取物3μg/mL。

具体实施方式

下面的实施例可以使本领域技术人员更全面地理解本公开，但不以任何方式限制本公开。

本次实验比较了桑黄的水提取物、60％乙醇提取物和95％乙醇提取物对体外培养的结肠癌细胞SW480增殖的抑制作用进行研究，探索桑黄中成分的抑癌机理。

仪器与试剂

LC-20AT岛津高效液相色谱仪，T6新世纪西外可见分光光度计。