[发明专利]一种百山祖冷杉高效嫁接的方法

说明书

本发明公开了一种百山祖冷杉高效嫁接的方法，旨在解决百山祖冷杉对低海拔地区气候条件适应性差的问题。本发明以百山祖冷杉试管苗为接穗，选取适应中低海拔地区生长的冷杉属其他物种试管苗为砧木，在保留砧木顶端分生组织的基础上，利用植物生长调节剂处理砧木与接穗接触表面后，嫁接百山祖冷杉的接穗，经过嫁接部位愈合、炼苗、移栽驯化等阶段获得百山祖冷杉嫁接苗。本发明利用百山祖冷杉和同属其他物种的无菌试管苗，短时间内获得较多的试管嫁接苗，且嫁接部位愈合速度快，成活率高，能够改善百山祖冷杉在自然条件下分布范围狭窄的问题。该方法快速高效，对改良百山祖冷杉，提高百山祖冷杉环境适应性，扩大百山祖冷杉适生海拔范围具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种百山祖冷杉高效嫁接的新方法，从而达到提高濒危物种对低海拔地区气候适应性的目的。

背景技术

百山祖冷杉(Abies Beshanzuensis M.H.Wu)是中国植物学者吴鸣翔于1976年发表的松科冷杉属新种，是我国特有的古老孑遗植物。自然条件下，百山祖冷杉群体数量极少，1987年，被国际自然保护联盟物种生存委员会列为全球最濒危的12种植物之一。

第三世纪百山祖冷杉曾在苏、浙、皖、闽等省广泛分布，然而，在经历了第四冰川时期和间冰期后，百山祖冷杉的生境发生了剧变，严重影响了百山祖冷杉的生长繁育，导致群体数量骤减，呈孤岛状分布。目前百山祖冷杉的野生植株仅存在于浙江省南部庆元县百山祖的高海拔地区(海拔1750m)，在中低海拔地区未见自然分布，由此可见百山祖冷杉对不同气候条件，尤其对不同海拔的自然条件适应性有限。同时，百山祖冷杉存在群体数量极少、种子败育率高和自然更新困难的问题，导致百山祖冷杉处于极度濒危的状态。因此需要探索一种快速改善百山祖冷杉适应性的新方法，以达到更新复壮百山祖冷杉的目的。

试管嫁接，是指对生长在试管内或培养皿中的植物幼苗进行嫁接而获得新植株的一种技术。和一般方法相比，试管嫁接技术具有许多独特的优点，可显著提高砧木与接穗之间的亲和力，同时减少了季节、温度、湿度、土壤等外部环境的限制。通过选取对不同海拔气候适应能力更强的同属近缘物种为砧木，保留砧木顶端分生组织的试管嫁接方法，有效地提高了百山祖冷杉嫁接的成活率，同时缩短了嫁接部位愈合的时间。因此，利用试管嫁接技术改良百山祖冷杉，可以获得海拔适应范围更广的百山祖冷杉植株，有效地促进了百山祖冷杉的更新复壮，为扩大百山祖冷杉种群数量提供坚实的基础。

发明内容

本发明的目的是提供一种百山祖冷杉高效嫁接的新方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种百山祖冷杉高效嫁接的方法，包括如下步骤：

(1)采摘百山祖冷杉与日本冷杉的球果，剥取其未成熟胚及胚乳进行培养，获得无菌的试管苗；

(2)在超净工作台上，依次将步骤1得到的试管苗置于体视显微镜下，利用无菌手术刀和镊子对其进行切割。然后，将其放置于含有湿润滤纸的培养皿中备用；其中，日本冷杉的试管苗作为砧木，切割时保留顶端分生组织；百山祖冷杉的试管苗作为接穗。

(3)在无菌条件下，将准备好的砧木和接穗放入含有植物生长调节剂水溶液中进行浸泡，然后将砧木和接穗放置于体视显微镜下进行试管嫁接，并用硅胶嫁接管固定嫁接部位；

(4)嫁接完成后，将嫁接试管苗接种至培养基上进行弱光培养，砧木和接穗愈合后，将其移至正常光照条件下培养；

(5)嫁接苗培养30d后，将嫁接试管苗进行高光强炼苗，并打开瓶口，使其逐渐适应外界环境。3d后，洗去植株根部附着的培养基，将植株移栽至人工配制的混合培养基质中，浇水至基质湿润，于人工气候箱中培养。

进一步地，在所述步骤(1)中，所述百山祖冷杉和日本冷杉的球果采摘时间为8月中旬。

进一步地，在所述步骤(1)中，所述用于嫁接的无菌试管苗苗龄是10～15d。