[发明专利]GalNAc修饰的美兰衍生物、制备方法与应用及肝靶向荧光探针、HClO检测方法

说明书

本发明提供了一种GalNAc修饰的美兰衍生物、制备方法与应用及肝靶向荧光探针、HClO检测方法，该荧光探针以N‑乙酰基‑D‑氨基半乳糖为肝靶向基团，可以作为HClO的检测试剂，对HClO显示了极快的响应速度，极高的选择性和极低的检测限。本发明荧光探针的制备方法简单，靶向于肝细胞和肝组织，能够实时监测HClO水平。

技术领域

本发明涉及一种荧光探针，具体地说是涉及一种GalNAc修饰的美兰衍生物、其制备方法与应用及肝靶向荧光探针、HClO的检测方法。

背景技术

次氯酸（HClO）是一种无色具有刺激性气味的液体，因其具有强氧化性，HClO主要作为消毒剂，用于室内空气、饮用水及供水设备、果蔬和食饮餐具等的消毒。同时，HClO也是一种具有强氧化能力的内源性生物分子。机体内的HClO主要由过氧化氢和氯离子在髓过氧化物酶（MPO）催化作用下产生。由于其在细胞的分化、迁移、传导和免疫等生理过程中起着非常重要的调控作用，同时，MPO介导的氯化压力被认为在药物性肝损伤过程中起着重要的作用。因此，对HClO的识别与检测有着非常重要的意义。

目前，检测次氯酸的主要方法有：比色法、电位分析法、化学发光法、库仑滴定法和荧光分析法等。相比之下，荧光探针法因其选择性好、灵敏度高、操作简便、实时检测，对生物样品无破坏性损伤以及适用于细胞和活体荧光成像等特点，已被广泛应用于活体内多种生物分子的检测。尽管如此，许多报道的HClO荧光探针仍存在响应时间长、选择性不高、灵敏度低以及对肝细胞和肝组织无靶向递送能力等问题。因此，发展选择性好、灵敏度高，靶向于肝细胞和肝组织以及能够实时监测HClO水平的荧光探针具有重要意义。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种GalNAc修饰的美兰衍生物。

本发明的目的之二是提供前述GalNAc修饰的美兰衍生物的制备方法。

本发明的目的之三是提供前述GalNAc修饰的美兰衍生物作为探针在检测次氯酸，或荧光光谱检测、紫外光谱检测，或细胞、组织、活体成像中的应用。

本发明的目的之四是提供一种肝靶向荧光探针。

本发明的目的之五是提供一种次氯酸的检测方法。

本发明的目的之一是这样实现的：

一种GalNAc修饰的美兰衍生物，其化学分子式为C₂₉H₄₁N₅O₈S，化学结构式如式I所示：

式I。

所述GalNAc修饰的美兰衍生物的化学名称为：N-(2-(2-(((2R,3R,4R,5R,6R)-3-乙酰胺基-4,5-二羟基-6-(羟甲基)四氢化-2H-吡喃-2-烷基)氧杂)乙氧基)乙基)-3,7-双(二甲氨基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺。

英文名称为：

N-(2-(2-(((2R,3R,4R,5R,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy)ethoxy)ethyl)-3,7-bis(dimethylamino)-10H-phenothiazine-10-carboxamide。

本发明的目的之二是这样实现的：

前述GalNAc修饰的美兰衍生物的制备方法，包括如下步骤：

（a）以美兰为原料，在碳酸钠弱碱性条件下，被连二亚硫酸钠还原，再与三光气反应，得到3,7-双(二甲氨基)-10H-吩噻嗪-10-碳酰氯；