[发明专利]2019-nCoV核酸检测试剂盒在审
| 申请号： | 202010589555.X | 申请日： | 2020-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN111808990A | 公开（公告）日： | 2020-10-23 |
| 发明（设计）人： | 袁青;郭文浒;林碧宇;杨露;陈浩 | 申请（专利权）人： | 阿吉安（福州）基因医学检验实验室有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州市博深专利事务所(普通合伙) 35214 | 代理人： | 唐燕玲 |
| 地址： | 350108 福建省福州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 2019 ncov 核酸 检测 试剂盒 | ||
1.2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，包括ORF1ab基因引物对、N基因引物对、内标引物对和探针组；
所述ORF1ab基因引物对包括SEQ ID NO.1所示的正向引物ORF1ab-F和SEQ ID NO.2所示的反向引物ORF1ab-R；
所述N基因引物对包括SEQ ID NO.3所示的正向引物N-F和SEQ ID NO.4所示的反向引物N-R；
所述内标引物对包括SEQ ID NO.5所示的正向引物β-actin-RNA-F和SEQ ID NO.6所述反向引物β-actin-RNA-R；
所述探针组包括SEQ ID NO.7所示的ORF1ab基因探针、SEQ ID NO.8所示的N基因探针和SEQ ID NO.9所示的内参探针。
2.根据权利要求1所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，所述ORF1ab基因探针、N基因探针和内参探针的3’端使用MGB、TAMRA或BHQ修饰，5’的修饰使用FAM、HEX、VIC、Cy3或Cy5修饰。
3.根据权利要求1所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，还包括缓冲体系、dATP、dUTP、dGTP、dCTP、Mg2+、Taq酶、UDG酶、MMLV逆转录酶和RNase抑制剂。
4.根据权利要求3所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，所述Mg2+的浓度为2-4mM。
5.根据权利要求1所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，所述dATP、dUTP、dGTP、dCTP的浓度均为0.5-2mM。
6.根据权利要求1所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，所述ORF1ab基因引物对、N基因引物和内标引物对的每个引物的浓度为200-500nM，所述探针组的每个探针的浓度100-300nM。
7.根据权利要求1所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，包括第一反应液、第二反应液和第三反应液；
所述第一反应液包括ORF1ab基因引物对、N基因引物对、内标引物对和探针组；
所述第二反应液包括缓冲体系、dATP、dUTP、dGTP、dCTP和Mg2+；
所述第三反应液包括Taq酶、UDG酶、MMLV逆转录酶和RNase抑制剂。
8.根据权利要求7所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，还包括阳性对照A，所述阳性对照A为含2019-nCoV ORF1ab基因片段的病毒样颗粒。
9.根据权利要求7所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，还包括阳性对照B，所述阳性对照B为含2019-nCoV N基因片段的病毒样颗粒。
10.根据权利要求7所述的2019-nCoV核酸检测试剂盒，其特征在于，还包括阴性对照，所述阴性对照为生理盐水。
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