[发明专利]呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型的建立方法

说明书

本发明涉及呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型的建立方法，属于小肠机械性损伤模型构建技术领域。本发明所述建立方法包括以下步骤：向1日龄肉鸡饲喂含10mg/kg呕吐毒素的全价饲料，饲喂7d后，得到呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型。本发明以呕吐毒素为诱导剂，成功建立了肉鸡小肠机械性损伤的模型，具有操作简便、结果可靠、重复性好的优点。

技术领域

本发明涉及小肠机械性损伤模型构建技术领域，具体涉及呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型的建立方法。

背景技术

家禽肠道具有双重功能，既是机体消化和吸收营养物质的重要器官，又是维持机体内环境稳态的先天性防御屏障。家禽的肠道屏障主要包括机械屏障、化学屏障、微生物屏障和免疫屏障，这四种屏障之间相互关联、共同维护家禽肠道健康。肠道机械屏障又称物理屏障，是机体防御外源微生物的第一道防线，主要由肠上皮细胞及其紧密连接等组成。闭锁蛋白(occludin)、闭合蛋白(claudins)和闭合小环蛋白(ZO-1、ZO-2和ZO-3)等是紧密连接的重要组成部分，当肠上皮细胞受到细菌和毒素等的侵扰时，紧密连接可发生移位阻止这些有害物质进入，避免肠道细胞损伤。当肠道机械屏障遭到破坏时，细菌和毒素会侵入肠道细胞引起肠道损伤的发生。

目前有关呕吐毒素损伤小肠上皮细胞的报道主要集中于细胞，对动物机体小肠损伤研究较少，更没有一种高效的小肠机械性损伤模型的建立方法。

发明内容

本发明的目的在于提供呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型的建立方法，使呕吐毒素损伤肉鸡模型的构建操作简便且效果稳定可靠。

本发明提供了一种呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型的建立方法，包括以下步骤：

向1日龄肉鸡饲喂含10mg/kg呕吐毒素的全价饲料，饲喂7d后，得到呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型。

优选的是，所述含10mg/kg呕吐毒素的全价饲料的制备方法包括以下步骤：

将禾谷镰刀菌培养物接种至大米中培养，得到呕吐毒素污染的大米，然后将呕吐毒素污染的大米制备成含10mg/kg呕吐毒素的全价饲料。

优选的是，所述大米包括香米。

优选的是，所述培养的温度为27℃，所述培养的时间为28d。

优选的是，所述禾谷镰刀菌培养物的制备方法包括以下步骤：

将禾谷镰刀菌接种至马铃薯葡萄糖琼脂培养基中，27℃培养7d，得到禾谷镰刀菌固体培养物；

将禾谷镰刀菌接种至马铃薯葡萄糖肉汤培养基中，27℃，180rpm培养7d，得到禾谷镰刀菌液体培养物。

优选的是，所述接种包括：将禾谷镰刀菌固体培养物和禾谷镰刀菌液体培养物同时接种到大米中。

优选的是，所述接种的量为每200g大米接种20～28g禾谷镰刀菌固体培养物和95～105mL禾谷镰刀菌液体培养物。

优选的是，建立呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型后，还包括对模型损伤的测定，所述测定的方法包括：测定损伤肉鸡小肠的淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶含量，测定绒毛高度和隐窝深度的比值、小肠的绒毛高度和隐窝深度，测定小肠上皮组织中关键紧密连接蛋白ZO-1、Occlaudin和claudin的mRNA表达及其蛋白表达。

本发明还提供了上述技术方案所述建立方法构建得到的呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型在筛选抑制呕吐毒素的药物或饲料添加剂中的应用。

本发明还提供了上述技术方案建立方法构建得到的呕吐毒素致肉鸡小肠机械性损伤模型在制备预防或治疗肠道疾病的药物中的应用。