[发明专利]杨树miR167a的前体基因及其在提前植物开花中的应用

说明书

本发明公开了一种杨树miR167a的前体基因，所述前体基因的序列如下:(a)由SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或(b)与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且经剪切后生成杨树miR167a的核苷酸序列。应用杨树miR167a前体基因序列，有望人为地控制植物开花。具体地，应用杨树miR167a的前体基因，有望调控杨树的花期，进一步地缩短甚至阻止杨树开花，以便阻止杨树花期飘絮的产生。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及杨树miR167a的前体基因及其在提前植物开花中的应用。

背景技术

MicroRNA(miRNA)是一类长度为21～24nt的非编码小分子RNA，它们动植物中广泛存在。miRNA能够在基因表达中起负调控其靶基因作用，通过在转录水平或者转录后水平上对基因组相关靶基因抑制其翻译或者切割靶基因来调控基因表达。miRNA普遍存在于各种动植物中，其功能涉及到生物生长发育、信号转导以及抵抗生物和非生物胁迫等各个生命进程的方面。miRNA可以指导RISC在转录后水平下调基因的表达，其作用方式主要有两个：导致靶mRNA的降解或翻译抑制。miRNA与其靶基因的互补程度决定了它以何种机制沉默靶基因。在植物中，大部分的miRNA介导其靶mRNA的降解，由于植物中的miRNA与相应的靶mRNA完全或近似完全配对时便引起靶mRNA的降解；然而，并不是所有的miRNA都介导靶mRNA的降解。迄今，杨树miR167a的前体基因的功能鲜有研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种杨树miR167a的前体基因，所述前体基因的序列如下:

(a)由SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或

(b)与SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且经剪切后生成杨树miR167a的核苷酸序列。

在一个实施方案中，所述杨树miR167a的核苷酸序列为SEQ ID NO：2。

本发明还提供了含有上述前体基因的重组载体、转基因细胞系或重组菌。

在一个实施方案中，上述重组菌为将上述前体基因插入表达载体得到的重组菌。

进一步，本发明还提供了杨树miR167a的前体基因在提前植物开花中的应用，所述前体基因的序列如下:

(a)由SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，或

(b)与SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且经剪切后生成杨树miR167a的核苷酸序列。

在一个实施方案中，上述杨树miR167a的成熟序列为SEQ ID NO：2。

在一个实施方案中，上述植物为拟南芥或烟草；优选地，所述植物是拟南芥。

在一个实施方案中，由于杨树miR167a本身序列很短，只有21个bp，而前体序列相对较长，通过将其前体序列连接到载体上，有利于转化实现，因此上述应用包括：将所述杨树miR167a的前体基因连接到载体上，通过农杆菌介导转化到拟南芥、筛选、培养和获得转基因株系。