[发明专利]一种小麦胚乳蛋白体面积的测定方法

说明书

本发明公开了一种小麦胚乳蛋白体面积的测定方法。该方法包括以下步骤：利用显微镜CCD配套软件ImageView对待分析的小麦胚乳显微镜图像进行二值化处理，通过调整二值化数值获得最佳的蛋白体识别度；调整所得二值化图像的颜色位数，然后通过分水岭功能实现对小麦胚乳蛋白体的区域识别及统计，在统计结果中去除细胞壁噪音后获得显微镜图像中蛋白体的像素值；将所得蛋白体像素值与原始小麦胚乳显微镜图像的总像素值进行比值计算，完成对小麦胚乳蛋白体相对面积的测定。本发明具有操作简便、分析科学合理、结果精确可靠的优点。

技术领域

本发明涉及小麦胚乳蛋白体的测试技术，特别是一种小麦胚乳蛋白体面积的测定方法。

背景技术

蛋白质是小麦胚乳重要的构成成分之一，其组分和含量的高低直接决定了面粉的加工品质。在小麦胚乳发育过程中蛋白质在一种被称为蛋白体的细胞器中积累，蛋白体的发育状况与外界环境密切相关，如干旱、低温、高温、氮肥等。在这些外界因素处理下蛋白体的发育进程不同、积累量不同、形态不同，因此在农学领域如何准确快速地定量细胞中蛋白体的积累量即相对面积显得尤为重要。

前人关于小麦蛋白体这类细胞器的相对面积的计算主要依靠Photoshop，Image-Pro Plus，Image J等软件。然而使用这些软件分析相对面积的流程复杂，例如需要使用Photoshop软件进行图像预处理包括去噪点、去污点、给细胞器人为着色等，同时Image-ProPlus和Image J这类软件还需要事先设定标尺，测量时根据需要选择标尺，操作过程容易出现标尺错误，使结果产生偏差，不方便初学者使用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作简便、分析科学合理、结果精确可靠的小麦胚乳蛋白体面积的测定方法。

实现本发明目的的技术解决方案为：一种小麦胚乳蛋白体面积的测定方法，包括以下步骤：

步骤1、利用显微镜CCD配套软件ImageView对待分析的小麦胚乳显微镜图像进行二值化处理，通过调整二值化数值获得最佳的蛋白体识别度；

步骤2、调整步骤1所得二值化图像的颜色位数，然后通过分水岭功能实现对小麦胚乳蛋白体的区域识别及统计，在统计结果中去除细胞壁噪音后获得显微镜图像中蛋白体的像素值；

步骤3、将步骤2所得蛋白体像素值与原始小麦胚乳显微镜图像的总像素值进行比值计算，完成对小麦胚乳蛋白体相对面积的测定。

进一步地，步骤1所述通过调整二值化数值获得最佳的蛋白体识别度，具体为：

调整二值化数值，根据照片明亮度增加或降低二值化的数值，使图片上蛋白体全部完整显示。

进一步地，步骤2中所述调整步骤1所得二值化图像的颜色位数，具体选择颜色位数为24位。

进一步地，步骤2中所述通过分水岭功能实现对小麦胚乳蛋白体的区域识别及统计，具体如下：

调用分水岭功能，将计数设置对话框的调整参数设置如下：拟合选择“不拟合”，孔洞选择“是”，风格选择“填充”，颜色1选择“黄色”，方法选择“是”，颜色2选择“黑色”，类型选择“序号”，面积和周长选择颜色位数为24位；点击确定完成区域识别及统计，在统计后的显微结构图中，被处理分析的区域呈现颜色1选择的黄色，不同区域以不同数字列出。

进一步地，步骤2中所述在统计结果中去除细胞壁噪音后获得显微镜图像中蛋白体的像素值，具体为：

将统计结果导出至Excel表格中，在Excel表格中得到所有分析区域的面积数值；观察统计后的显微结构图，并与原始显微结构图对比，将非蛋白体区域即非圆形的区域对应的编号删除，得出净蛋白体区域的面积像素值。

进一步地，步骤3所述将步骤2所得蛋白体像素值与原始小麦胚乳显微镜图像的总像素值进行比值计算，完成对小麦胚乳蛋白体相对面积的测定，公式如下：