[发明专利]CD74蛋白在制备识别缺血损伤后脑中巨噬细胞亚群试剂盒中的应用

说明书

本发明公开了CD74蛋白在制备识别缺血损伤后脑中巨噬细胞亚群试剂盒中的应用。本发明是基于本发明发明人首次发现CD74蛋白可以将巨噬细胞区分为两个亚群：CD74^hi和CD74^medium。本发明有利于进一步研究缺血脑组织中巨噬细胞所发挥的功能。

技术领域

本发明属于生物医学领域，特别涉及CD74蛋白在制备识别缺血损伤后脑中巨噬细胞亚群试剂盒中的应用。

背景技术

2016年的全球疾病负担(Global Burden of Disease，GBD)数据显示脑卒中是全球范围内导致死亡和残疾的第二原因，其中又以东亚的发病率最高(Gorelick,2019)。随着我国人口平均寿命延长和社会的老龄化，过去30年里我国脑卒中疾病负担有爆发式增长的态势，40岁以上脑卒中现患病人数已超过1,200万(中国脑卒中防治报告2018)。脑卒中给个人带来巨大的身心痛苦，给家庭及社会造成沉重的经济负担。

近年随着对炎症在脑缺血损伤和修复中作用认识和研究的深入，炎症被认为是影响脑卒中结局的主要决定因素，也是目前开发新的脑卒中治疗方法的重要靶点(Dziedzic,2015；Lambertsen,Finsen,Clausen,2019)。参与该炎症应答过程的主要有两类细胞：脑中固有的小胶质细胞和从外周血募集而来的单核细胞/巨噬细胞(Liddelow et al.,2017；Anet al.,2014；Tang et al.,2006)。从外周血募集到脑中巨噬细胞是一个复杂的细胞群体(MosserEdwards,2008)。单核细胞来源的巨噬细胞被分为经典活化的促炎(M1-)巨噬细胞和交替活化的抗炎(M2-)巨噬细胞。前者促进炎症反应，后者促进组织再生(Kigerl etal.,2009；MosserEdwards,2008)。在不同的组织损伤后，这些单核细胞/巨噬细胞亚群依次被激活，并协调了早期炎症反应以及随后的结构重塑和修复(Planas,2018)。此外还可根据表面分子的差异可以分为两个亚群(Garcia-Bonilla et al.,2016)：表达高水平Ly-6C抗原和C-C趋化因子受体2(CCR2)的促炎单核细胞，通过CCR2，这一类型的细胞被招募到急性炎症部位，释放促炎细胞因子如白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-a(TNF-α)，促进坏死细胞清除；表达低水平Ly-6C抗原和CX3C趋化因子受体(CX3CR1)的抑炎单核细胞，通过fractalkine受体CX3CR1招募ly-6c低表达的单核细胞，释放抗炎介质，如转化生长因子-包裹体、IL-10和VEGF(vascular endothelial growth factor,inhibitor)，从而抑制炎症，增强新生血管生成和组织修复。目前对单核细胞/巨噬细胞在脑缺血损伤中的确切作用还不清楚，发挥保护作用，加重损伤或者没有作用的报道都有(Schmidt et al.,2017)，这可能与其存在着多种不同的亚群有关。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供CD74蛋白在制备识别缺血损伤后脑中巨噬细胞亚群试剂盒中的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：CD74蛋白在制备识别缺血损伤后脑中巨噬细胞亚群试剂盒中的应用，是基于本发明发明人首次发现CD74蛋白可以将巨噬细胞区分为两个亚群：CD74^hi和CD74^medium。

所述的试剂盒包括用于识别CD74蛋白的试剂。

所述的用于识别CD74蛋白的试剂包括CD74蛋白抗体；更优选为荧光标记的CD74蛋白抗体。

所述的荧光标记优选为FITC。

一种识别缺血损伤后脑中细胞亚群的方法，是通过应用上述试剂盒实现，包括如下步骤：

(1)提取动物脑组织单个核细胞；

(2)对单个核细胞中的CD74蛋白进行定量；