[发明专利]一种试剂盒及检测有机磷毒剂的方法

说明书

本公开涉及一种试剂盒，其包括基底，所述基底包括表面覆有银纳米颗粒的支持体；乙酰胆碱酯酶(AChE)试剂；乙酰硫胆碱(ATCh)试剂；和5,5'‑二硫代双(2‑硝基苯甲酸)(DTNB)试剂。该试剂盒便于携带，配合拉光谱仪，能够用于有效检测有机磷毒剂。

技术领域

本公开术语检测领域，具体涉及一种试剂盒及检测有机磷毒剂的方法。

背景技术

有机磷毒物包括有机磷农药和神经性毒剂(NAs)，均属于有机磷化合物(OPs)。其中神经性毒剂是毒性最强的化学战剂，曾多次被用到战争或恐怖袭击中。其致伤机理均是通过磷酸化作用使中枢神经系统胆碱酯酶的失活，破坏乙酰胆碱对神经冲动的传导，导致胆碱的不断蓄积，进而导致人/畜死亡，严重威胁着国家和公共安全。建立准确、灵敏的神经性毒剂现场快速检测方法是公共安全和环境安全的迫切需求。

发明内容

发明人发现了一种检测有机磷毒物的方法，该方法基于有机磷毒剂毒物的主要毒性靶点乙酰胆碱酯酶(AChE)，利用了探针分子TNB的特征拉曼峰强度，构建了基于AChE酶活的特异性传感体系，实现了有机磷毒剂毒物间接检测，在此基础上，将上述传感分子修饰于银纳米体上，实现有机磷毒物的有效检出，且具有改善的检测效果。

在一些方面，本公开提供一种试剂盒，其包括

检测基底，检测基底包括支持体和银纳米体，银纳米体附着于支持体的表面；

试剂包组合，试剂包组合具有以下特征(1)或(2)；

(1)试剂包组合包括第一试剂包和第二试剂包；

第一试剂包含有乙酰胆碱酯酶(AChE)；

第二试剂包含有乙酰硫胆碱(ATCh)和5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)的混合物；

(2)试剂包组合包括第一试剂包、第三试剂包和第四试剂包；

第一试剂包含有乙酰胆碱酯酶(AChE)；

第三试剂包含有乙酰硫胆碱(ATCh)；

第四试剂包含有5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)。

在一些实施方案中，银纳米体在至少一个维度的尺寸为10nm-200nm，例如10～100nm，例如40～60nm。

在一些实施方案中，银纳米体的形态选自球形、多面体形、棒状、星形和爆米花型。

在一些实施方案中，支持体是的材质是硅。

在一些实施方案中，银纳米体是球形银纳米颗粒，其平均粒径为10～200nm，例如10～100nm，例如40～60nm。

在一些实施方案中，第一试剂包含有乙酰胆碱酯溶液，其中乙酰胆碱酯酶浓度为30-70nM，例如50nM。

在一些实施方案中，第二试剂包含有乙酰硫胆碱和5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)的混合溶液，其中，其中，乙酰硫胆碱的浓度为50-200ng mL^-1(例如100ng mL^-1)，5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)的浓度为1-4μM，例如2μM。

在一些实施方案中，第三试剂包含有乙酰硫胆碱溶液，其中乙酰硫胆碱的浓度为50-200ng mL^-1(例如100ng mL^-1)。

在一些实施方案中，第四试剂包含有5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)溶液，其中5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)的浓度为1-4μM，例如2μM。