[发明专利]一种桔梅奇酵母液体制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种桔梅奇酵母液体制剂及其制备方法和应用，属于果蔬保护剂技术领域。桔梅奇酵母液体制剂包括糖保护剂，抗氧化剂，乳化剂，增效剂，其余为桔梅奇酵母菌悬浮液。其制备方法为：将桔梅奇酵母进行接种培养，得到酵母菌悬浮液；然后与溶解后的糖保护剂，抗氧化剂，乳化剂和增效剂混合，即得。本发明的桔梅奇酵母液体制剂，通过提高酵母的生物活性，降低菌体氧化损伤，增强酵母胁迫耐受性，以及提高酵母生防效力，从而提高桔梅奇酵母菌在保存过程中的存活率；且其制备方法操作简单，条件温和，安全环保；相比于现有的化学保鲜剂，具有安全环保，方便使用，生防效力高等优点，在采后果蔬病原菌浸染的防治方面，具有实用价值，适宜推广应用。

技术领域

本发明涉及果蔬保护剂技术领域，具体涉及一种桔梅奇酵母液体制剂及其制备方法和应用。

背景技术

具有拮抗作用的梅奇酵母属菌株是广泛存在于自然界的一类酵母菌种，主要存在于含糖量较为丰富的果实表面和花上，是果蔬防止采后病原菌侵染的天然屏障。国内外大量研究表明，该属菌株能用于桃、葡萄、樱桃、草莓、柑橘等果实采后病害的防治。该菌生长速度快，营养简单，生长力强。在作为生防菌应用方面，它拥有自己独特的优势：1)对环境的污染较少，不产生毒素；2)不产生抗生素，对人类相对比较安全；3)相对于其他真菌而言，不产生致敏孢子；4)所需营养比较简单；5)适合商业化大规模生产。

桔梅奇酵母(Metschnikowia citriensis)是从柑橘叶片表面分离得到的一株新种酵母，对柑橘采后青霉病、绿霉病以及酸腐病有极好的防治效果，其主要生防机制是对病原菌菌丝的附着并形成生物膜，以及通过栗色素的形成消耗病原菌生长所需的铁离子。但是，关于该菌株在采后领域的商业化应用少有研究报道。

拮抗酵母制剂按形式分类，通常可以分为干制剂和液体制剂两种形式，其中液体制剂具有制备简单、价格低廉、方便使用等优点，常无需活化即可使用。由于采后生物防治拮抗菌是活体微生物的特点，生物制剂在制备时需确保能够达到或接近原种拮抗酵母的活力和效力。然而，在液体制剂制备以及保存过程中，微生物常受到氧化损伤、渗透压胁迫等作用，造成微生物存活率降低，使得生防效力大大减弱。因此，需添加生物活性保护剂，增强酵母胁迫耐受性，提高存活率。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种桔梅奇酵母液体制剂及其制备方法。

经研究，本发明提供以下技术方案：

1、一种桔梅奇酵母液体制剂，所述桔梅奇酵母液体制剂按重量百分比计，包括1～20％糖保护剂，0.05～2％抗氧化剂，1～20％乳化剂，0.5～5％增效剂，其余为桔梅奇酵母菌悬浮液。

优选的，所述糖保护剂为乳糖或海藻糖。

优选的，所述抗氧化剂为L-抗坏血酸或谷氨酸钠。

优选的，所述乳化剂为阿拉伯树胶或吐温80。

优选的，所述增效剂为脯氨酸或氯化钙。

优选的，所述糖保护剂为海藻糖；所述抗氧化剂为谷氨酸钠；所述乳化剂为吐温80；所述增效剂为脯氨酸。

更优选的，所述桔梅奇酵母液体制剂按重量百分比计，包括19.74％海藻糖，1.05％谷氨酸钠，4.24％吐温80，1.11％脯氨酸，其余为桔梅奇酵母菌悬浮液。

2、上述桔梅奇酵母液体制剂的制备方法，包括以下步骤：

将桔梅奇酵母接种到酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基上，活化培养；

用接种环挑取2环酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基上的酵母单菌落至酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂液体培养基中进行培养，得发酵液；

将发酵液按5％的比例加入酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂培养基中进行培养，结束后将培养液离心，收集菌体，洗涤，重悬，得酵母菌悬浮液；