[发明专利]一种嗜鞣管囊酵母和酿酒酵母发酵生产纤维质乙醇的方法

权利要求书

1.一种嗜鞣管囊酵母和酿酒酵母发酵生产纤维质乙醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）菌种选择：选用经定向驯化的嗜鞣管囊酵母和酿酒酵母菌株；

（2）斜面培养：取嗜鞣管囊酵母菌株1-2环，接种至改良后的含琼脂1.5-2.0%YPD培养基Ⅰ，培养基Ⅰ含重量百分比的1%酵母膏，1%蛋白胨，1%葡萄糖，2%木糖，30-32℃培养36-48h；取酿酒酵母菌株1-2环，接种至含琼脂1.5-2.0%YPD培养基Ⅰ，30-32℃培养36-40h；

（3）种子培养：将步骤2中嗜鞣管囊酵母菌株挑取1-2环，接种至含重量百分比2-4%葡萄糖、3-5%木糖的麦芽汁培养基Ⅱ，30-32℃，转速100-150rpm，培养16-24h；将酿酒酵母菌株挑取1-2环，接种至含重量百分比4-6%葡萄糖麦芽汁培养基Ⅲ，30-32℃，转速100-150rpm，培养16-24h；

（4）种子扩培：以5-15%接种量将步骤3中嗜鞣管囊酵母种子转接至1000ml-2000ml扩培培养基Ⅳ，30-32℃，转速100-150rpm，培养16-24h，所述培养基Ⅳ为含重量百分比2-4% 葡萄糖、3-5%木糖的麦芽汁培养基；将酿酒酵母菌株转接至1000ml-2000ml扩培培养基Ⅴ，所述培养基Ⅴ为含重量百分比4-6%葡萄糖麦芽汁培养基；

（5）发酵培养：以8-10%接种量，将步骤4中酿酒酵母菌株接种至发酵培养基，发酵培养基组成为含重量百分比10-14%葡萄糖，4-6%木糖蒸汽爆破物料酶解液，培养条件32-35℃，转速100-300rpm，利用0.5mol氢氧化钠调节pH4.5-5.0，发酵至36-48h；以10-15%接种量接入嗜鞣管囊酵母菌种，继续发酵至60-72h；

（6）直接取发酵液蒸馏获得乙醇。

2.如权利要求1所述的一种嗜鞣管囊酵母和酿酒酵母发酵生产纤维质乙醇的方法，其特征在于，所述步骤1中菌株嗜鞣管囊酵母可市售获得。

3.如权利要求1所述的一种嗜鞣管囊酵母和酿酒酵母发酵生产纤维质乙醇的方法，其特征在于，所述步骤3、4中培养时间优选16-18h。

4.如权利要求1所述的一种嗜鞣管囊酵母和酿酒酵母发酵生产纤维质乙醇的方法，其特征在于，所述步骤5中接种量优选10-12%，培养温度优选32-34℃，转速优选150-250rpm。

5.如权利要求1所述的一种嗜鞣管囊酵母和酿酒酵母发酵生产纤维质乙醇的方法，其特征在于，所述步骤5中蒸汽爆破条件为：蒸汽压力1.0-1.2Mpa，作用时间10-15min。

6.如权利要求1所述的一种嗜鞣管囊酵母和酿酒酵母发酵生产纤维质乙醇的方法，其特征在于，所述步骤5中酶解液制备：蒸汽爆破后的物料控制固形物含量25-33%，添加一定量复合酶，50±1℃，ph4.8-5.0条件下水解48-60h。