[发明专利]细胞渗透短肽TAT-HNS-3及对炎性疾病的应用

说明书

本发明涉及一种细胞渗透短肽TAT‑HNS‑3及对炎性疾病的应用，其特征在于：对由炎症因子升高导致的炎性疾病的细胞渗透短肽TAT‑HNS‑3，其氨基酸序列为YGRKKRRQRRR‑SPMGVDHMSGLSGVNVPGNASSG，针对由炎症因子升高导致的炎性疾病包括肺部炎症，哮喘，花粉过敏，肾炎药品中的应用；其能够特异性的抑制HuR‑PARP1/HuR‑HuR相互作用，以及炎症因子的表达，对细胞的增殖和生存均没有影响，这为细胞穿膜肽的药物开发提供了保障，是一种应用于治疗炎症疾病的新方法。

技术领域

本发明涉及一种细胞渗透短肽TAT-HNS-3对炎性疾病的应用，属于医学领域。

背景技术

真核生物的基因表达调控错综复杂，转录后水平调控在基因精确严密表达的过程中发挥重要的作用，其中mRNA降解决定mRNA稳定性，进而影响蛋白质的表达量^[1]。mRNA表达的多少决定了将要被翻译出的蛋白质的含量，在这种情况下mRNA即使发生微小的变化都会引起蛋白质含量的巨大改变。炎症因子，细胞因子的mRNA通常情况下在细胞内为低表达，只有在细胞受到外界的刺激情况下才会引起它们的累积，以此翻译出帮助细胞应对外界刺激反应的细胞因子。在整个过程平息之后，这些mRNA也会随之降解。如果在这个过程中，某一个环节出现了错误，使得这些与炎症相关的mRNA没有正常的被降解，就会引起细胞因子的过表达，从而引起细胞的过度反应，导致一些自身免疫疾病，慢性炎症甚至是癌症的发生^[1-3]。哺乳动物细胞中大约8％的mRNA在其3’非翻译区含有ARE元件，ARE元件是一段AU富集序列。含有ARE元件的mRNA均为容易降解的mRNA^[4]。mRNA的稳定性受到RNA结合蛋白的调控。多数的ARE结合蛋白都介导了mRNA的降解作用，而HuR是为数不多的对mRNA起到稳定性的RNA结合蛋白，因此受到人们的广泛关注。

作为在基因的转录后调控中扮演重要角色的RNA结合蛋白，HuR能在诸如癌症、炎症等疾病的产生和发展过程中起到重要作用。在巨噬细胞、内皮细胞、肠上皮细胞，以及在结肠癌、胃癌和宫颈癌细胞中，HuR能够结合促炎细胞因子IL-8、TGF-β和IFN-γ的mRNA，进而增强这些因子的表达^[5-7]。炎症相关的疾病中，如风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)中HuR促进TNF-α的表达^[8,9]。在风湿性软骨和骨关节炎中，HuR参与了COX-2的调节^[10]。在肠道炎症(inflammatory bowel disease)中，HuR能够上调肠上皮细胞中的COX-2的表达^[11]。在慢性炎症疾病哮喘中，HuR参与了TNF-α,GM-CSF等因子表达的上调^[12]。目前已知，HuR能够通过与促炎因子的mRNA相互作用发挥显著地促进炎症反应的作用。

HuR的功能主要是通过蛋白修饰来实现，我们实验室前期工作中发现，细胞受到外界刺激时，HuR能够发生一种聚ADP核糖化(PARylation)修饰。PARP1，身为PARP家族中最重要的成员，参与了细胞内最多的聚ADP核糖化修饰^[13]。在细胞受到外界刺激的情况下，PARP1能够与HuR相互作用，进而对HuR进行PAR化修饰，HuR发生PAR化修饰后，HuR的出核受到促进^[14]。除此之外，有研究证实HuR蛋白能够发生寡聚化，即，HuR-HuR相互作用，并且这种寡聚化对于HuR发挥稳定mRNA的作用是必须的^[15,16]。我们前期的结果发现，PAR化修饰同样能够促进HuR-HuR的相互作用。我们前期的实验已经证明HuR的HNS结构域能够介导HuR-PARP1以及HuR-HuR的相互作用^[14]。