[发明专利]来源于枸杞叶绿体的DNA条形码及其鉴定枸杞种属的方法在审
申请号: | 202010607987.9 | 申请日: | 2020-06-30 |
公开(公告)号: | CN111733272A | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 石志刚;万如;王秀英;张曦燕;李云翔;杨利斌;王孝;马婷慧 | 申请(专利权)人: | 宁夏农林科学院枸杞工程技术研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6869 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 张倩 |
地址: | 750002 宁夏回族*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 来源于 枸杞 叶绿体 dna 条形码 及其 鉴定 种属 方法 | ||
1.一种利用DNA条形码鉴定枸杞品种的方法,其特征在于:所述DNA条形码为rpoB条形码。
2.如权利要求1所述一种利用DNA条形码鉴定枸杞品种的方法,其特征在于:步骤如下:
1)从枸杞样品中提取基因组DNA;
2)以所述基因组DNA为模板,用如核苷酸序列SEQ ID NO.37和SEQ ID NO.38所示引物扩增rpoB条形码的序列片段,得到PCR产物;
3)对所述PCR扩增产物进行测序;
4)构建系统进化树,鉴定枸杞。
3.如权利要求2所述一种利用DNA条形码鉴定枸杞品种的方法,其特征在于:所述步骤1)中,提取枸杞样品的DNA采用试剂盒进行抽提。
4.如权利要求2所述一种利用DNA条形码鉴定枸杞品种的方法,其特征在于:所述步骤2)中,PCR扩增的反应体系为:①94℃预变性2min;②94℃变性30s,55-60℃退火30s,72℃延伸2min,35次循环;③72℃保温10min;④4℃保存。
5.由权利要求1-4任一所述方法构建的枸杞样本rpoB条形码数据库,包含rpoB条形码36条,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-36所示。
6.权利要求5所述枸杞样本rpoB条形码数据库在鉴定枸杞品种中的用途。
7.如权利要求6所述枸杞样本rpoB条形码数据库在鉴定枸杞品种中的用途,其特征在于:步骤如下:通过将待鉴定样品的rpoB条形码序列与所述rpoB条形码数据库中的序列进行比对,以鉴定枸杞品种,确定枸杞的种间关系。
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