[发明专利]牛大力多倍体的诱导方法

说明书

本发明公开了一种牛大力多倍体的诱导方法，其方法为牛大力花朵授粉后采用氨磺灵处理，待果实成熟，收获果实、播种育苗及染色体鉴定即可。本发明提供的多倍体诱导方法具有见效快、成本低、操作简单、方便实施、诱导效率高、不产生嵌合体等特点。

技术领域

本发明涉及多倍体育种领域。更具体地说，本发明涉及一种牛大力多倍体的诱导方法。

背景技术

牛大力，又名大力牛、大力薯、甜牛力、甜牛大力、扒山虎、山莲藕等，是豆科蝶形花亚科崖豆藤属植物美丽崖豆藤(Millettia Speciosa Champ)。牛大力以干燥的块根入药，性平、味甘，归肾、肺经，具有活络强筋、润肺补虚和健脾强身的功效。牛大力的药用历史悠久，《生草药性备要》最早记载其：“壮筋活络，补虚润肺。治肺结核，慢性肝炎，腰腿痛，风湿痹痛”。随后，《陆川本草》亦记载其：“解毒清凉，止咳清肺。治痢疾，咳血，头晕，温病身热口渴”。临床研究表明：牛大力对肺结核、肺虚咳嗽、病后体虚、腰肌劳损、肾虚带下、风湿性关节炎、慢性支气管炎等多种慢性疾病有显著的疗效。自20世纪70年代起，岭南地区的广大民众开始用牛大力来制备药膳、药酒或煲汤等，此外，牛大力作为强力健身胶囊和壮腰健肾丸等中成药生产的主要原料而被广泛应用。

植物多倍体具有更大的形态，可大幅提高相应部位的产量，增强抗逆性，提高活性成分含量。目前，采用秋水仙素离体诱导同源四倍体是获得多倍体植株的主要途径。苏钰琴等也主要采用一定浓度的秋水仙素处理离体组培苗获得牛大力多倍体(CN 107027623 A一种多倍体牛大力品种的培育方法)。然而，采用秋水仙素处理毒性大；在离体条件进行处理，需要具备较高的组织培养条件；组培苗处理后普遍存在嵌合体，需要多代鉴定和倍性纯化，操作程序复杂，工作量大。微管抑制剂Oryzalin(氨磺灵)是诱导四倍体的新型化学诱导剂，诱导机理与秋水仙素相似，具有植物多倍体诱导效率高、毒性小的特点，是替代秋水仙素的新产品，现已用于百合、罗汉果等植物多倍体诱导中。然而，不同植物特性不同，采用Oryzalin处理的方式和效果也存在很大差异。未见Oryzalin在诱导牛大力多倍体方面的研究和报道。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种牛大力多倍体的诱导方法，其具有见效快、成本低、操作简单、方便实施、诱导效率高、不产生嵌合体等特征。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种牛大力多倍体的诱导方法，牛大力花朵授粉后采用氨磺灵处理，待果实成熟，收获果实、播种育苗及染色体鉴定。

优选的是，授粉方法为：牛大力开花的当天上午8：00-11：00，将花瓣压至果柄处，使雄蕊露出，将侧面花粉密集处对准雌花柱头轻轻触碰，完成授粉。通过将花粉密集处对准雌花柱头，有利于提高花粉的受精率。

优选的是，牛大力授粉24h-36h后用氨磺灵浸泡处理10-15h。

优选的是，氨磺灵水溶液配制方法为：用二甲基亚砜(DMSO)溶解所需质量的氨磺灵，然后将配置的氨磺灵溶液滴加入蒸馏水中，滴加过程中不断摇匀蒸馏水，保证无药剂析出，液体为黄色，DMSO用量为最终配制水溶液的1-3％。

优选的是，所述氨磺灵水溶液的浓度为130-150μmol/L。

优选的是，氨磺灵处理授粉后的牛大力花朵的方法为：在牛大力花蕾期，使用布袋将花蕾套住，向布袋内以喷雾的形式喷入多胺溶液，每隔3-5小时喷一次，在盛开期授粉后6-12h以喷雾形式喷入蔗糖和多胺水溶液，24-36h后，以喷雾形式喷入氨磺灵水溶液，每隔4-5h喷入一次，喷入2-3次，然后以喷雾形式喷入清水至滴水为止。

优选的是，所述多胺包括精胺、亚精胺和腐胺。

本发明至少包括以下有益效果：